远蛋白印迹分析是分析蛋白质-蛋白质相互作用的另一种方法,它需要用标记的诱饵蛋白探测凝胶电泳分离的蛋白质,然后通过多种方法检测相互作用的蛋白质(猎物)。近年来,远蛋白印迹分析已被用于确定受体-配体相互作用和筛选相互作用蛋白的文库。通过这种分析方法,可以研究翻译...
1、制备上样体系：将蛋白溶液与5×loading buffer以及PBS混合，以调整蛋白上样量至20-50ug的范围。2、进行上样：在电泳槽的最左和最右孔中，加入SDS-PAGE loading buffer，以确保条带平整；随后，在中央或靠近两端的孔中，分别加入3-5ul的蛋白maker作为参照；最后，将制备好的蛋白样品（9ul）加入到相应的孔道中...
步骤:1. 样品制备及蛋白提取;2. SDS-PAGE电泳分离;3. 转膜至PVDF/硝酸纤维素膜;4. 封闭非特异性结合位点;5. 一抗孵育结合目标蛋白;6. 二抗(标记酶或荧光)孵育;7. 显色或化学发光检测信号。 1. **原理判断**:Western blot核心是抗原抗体反应,需电泳分离、转膜固定;两步抗体确保特异性放大信号。 2. *...
蛋白印迹结果的线性分析指南 一、引言 蛋白印迹(Western Blotting)是一种常用的分子生物学技术,用于检测和分析特定蛋白质在细胞或组织样本中的表达水平。为了获得准确和可靠的实验结果,对蛋白印迹结果进行线性分析是至关重要的。本文将介绍如何进行蛋白印迹结果的线性分析,包括数据收集、处理、分析和解释等方面。 二、材料...
全自动蛋白印迹定量分析系统品牌型号:Protein simple Abby Abby采用微量毛细管,从3~5μL样品中自动吸取、分离、捕获蛋白质,并通过后续的免疫反应和化学发光检测定量目的蛋白,3~4小时即可完成一轮Western实验。全程自动化、标准化,结果快速准确。广泛应用于蛋白质性质鉴定、蛋白质表达定量分析、蛋白质功能研究、蛋白质修饰...
【VIP专享】蛋白印迹分析 【实验目的】了解蛋白质印迹法的基本原理及其操作和应用。【实验原理】蛋白质印迹法又称为免疫印迹法，这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学 技术方法。待测蛋白既可以是粗提物也可以经过一定的分离和纯化,另外这项技术的应用需要利用待测蛋白的单克隆或多克隆抗体进行识别。如图...
①目的蛋白质未充分转移到膜上或洗膜过度,应使用丽春红S染色以检查转膜效果,或减少洗膜次数,缩短洗膜时间; ②抗体不匹配或一抗过期或一抗不能识别变性或还原的蛋白质,应注意选择特异性的抗体并在有效期内使用,或改用非变性凝胶系统; ③抗体浓度低,应适当增加抗体浓度,或延长孵育时间; ...
蛋白免疫印迹实验的第一步是样品制备。通常,您可以从细胞培养物、动物组织或微生物培养物等样品中收集蛋白质。在此过程中,您需要避免蛋白质的降解和失活。 以下是一般的样品制备步骤: a. 收集细胞或组织:使用适当的缓冲液洗涤细胞或组织,以去除杂质和外部污染物。
蛋白质印迹成像定量分析系统是Western Blot成像系统,适用于所有凝胶成像和化学发光成像。拥有*大的成像区域和*高规格的摄像头。这两种相机选项,600万像素和900万像素,都被冷却到-57°C,并产生65536灰度的16位图像,以实现出色的量化。这些系统在425nm处有73%的量子效率,即使是*微弱的信号也能探测到。 蛋白质印迹成...
1.在选择蛋白印迹成像与定量分析技术时，需要综合考虑实验的具体需求、灵敏度要求、操作简便性、成本以及设备的可用性等因素。例如：2.如果实验需要高灵敏度和宽线性范围的成像技术，且成本不是主要考虑因素，那么底物化学发光（ECL）结合数字成像系统可能是一个不错的选择。3.如果实验需要同时检测多种蛋白或进行精确...