为了避免AM/PI荧光重叠现象,可以在染色步骤中注意以下几点: 1. 在收集细胞后,用1x的Assay Buffer洗涤细胞,并离心去除胰酶及残留的酯酶,以确保细胞的健康状态。 2. 在加入Calcein-AM进行染色时,要确保细胞悬液的细胞量在1×105~6个/ml之间,并按照每1ml的细胞量加入1-2ul的Calcein-AM...
1、在选择荧光染料的时候，选择相距波长较远的荧光染料，以Absin的多色试剂盒为例，选择四色（TSA520、TSA570、TSA650、DAPI）、五色（TSA520、TSA570、TSA620、TSA700、DAPI）和七色plus（TSA480、TSA520、TSA570、TSA620、TSA700、TSA770、DAPI），这几个试剂盒里的染料之间是几乎不会有串扰的情况。如染料TSA...
免疫荧光信号重叠是指在进行免疫荧光染色时，由于荧光标记物的光谱重叠或样本的复杂性，导致不同荧光信号在同一个样本中同时出现，从而产生荧光信号的重叠现象。这种现象可能导致对荧光信号的解读出现误差，进而影响实验结果的准确性。因此，在进行免疫荧光染色时，应该选择光谱分离度较高的荧光标记物，并采取适当的措施来...
如何分析共聚焦图的荧光重叠度 Image J的进阶版FiJi或者Image J 用Image J打开图片(可以是Image J里的open打开,也可以直接将图片拖进Image J)→拆分通道:Image J→Color→Split Channels→画线→Analyze→Tools→ROI Manager→Add,在每张图片上都点击Add的东西,所有的图片都是出现同一条线→Image→8 bit→Analyze...
PE-FITC补偿可以有效纠正荧光重叠造成的检测误差,提高流式细胞术的准确性和可靠性。在实验中,如果没有进行PE-FITC补偿,可能会导致误判或漏判的情况出现,影响实验结果的准确性和可靠性。 总之,PE-FITC补偿是流式细胞术中非常重要的一步,需要认...
重叠冠号 按荧光特点可以分为:小桃红、幸运树、金钱树,一品红、宝石红。荧光对应的冠号:一品红:948、696、665宝石红:88幸运树:金钱树:80、93、94、96(关门冠、且拥有荧光小桃红与金钱树并存)、97补号冠 小桃红:76、96 96桃红金钱树为什么金贵,因为它是唯一两个荧光重叠的品种,它又是关门冠,最后一个冠,发行...
小弟不太清楚文献里说的“荧光重叠”（overlapping fluorescence）的原理是什么，求大神讲解。文献里的意思...
荧光PCR引物和探针重叠技术是一种通过在PCR反应中同时使用引物和探针来检测目标DNA序列的方法。这种技术的原理是,引物和探针的序列在目标DNA序列上有重叠,当PCR反应进行到特定温度时,引物和探针会结合到目标DNA上,引发荧光信号的释放。通过检测荧光信号的强弱可以确定目标DNA的存在与否。 在基因检测中,荧光PCR引物和探针...
PI染的时间太长了。或者是。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。这个原因。 贴壁细胞经 0.25%胰酶-EDTA 消化后,收集细胞,用 1x 的Assay Buffer 洗涤细胞,450g,离心 5min,2 次,去除胰酶及残留的酯酶。染色步骤 (
该系数的取值范围从0到1,其中0表示没有重叠,1表示完全重叠。 举个例子,假设我们正在研究特定细胞类型中两个蛋白质A和B的共定位情况。我们使用针对蛋白质A和蛋白质B的抗体进行免疫荧光染色,然后使用共聚焦显微镜捕获荧光图像。通过分析图像中像素的强度值,我们可以计算蛋白质A和蛋白质B之间的共定位系数。该系数将...