单分子成像追求看得见信号,不会被噪声淹没;而超分辨成像追求看得清楚复杂精细的结构。 如何证明探测到的信号确实是单分子荧光信号呢?可以利用单分子的以下几个特征: 特征1:荧光闪烁 在显微镜下观察时,每一个分子的荧光发射都是不连续的,每个光点时而发光,时而不发光,而且每个亮点之间的闪烁并不同步。 暗态 特征2:...
单分子定位显微术实现超分辨成像的关键在于在时间域上分离密集的荧光分子以及超高的单分子定位精度(10纳米左右)。具体而言,该技术通过使用闪烁的荧光分子达到分离密集荧光分子的目的,进而可以在任意的时间域内捕获并定位单个分子,最后重构出超分辨...
用于超分辨成像的荧光蛋白被分为三类。第一类是不可逆的光激活荧光蛋白,这类荧光蛋白的荧光可以通过特定波长的光激发,激发后不能恢复到激发前不发光的状态;第二类是光转移荧光蛋白,这类荧光蛋白的激发光谱和发射光谱可以通过光照来移动改变;第三类是光学开关荧光蛋白,这类荧光蛋白的荧光可以通过光照来实现“开和关”状...
对带有免疫染色脑切片的盖玻片放置在配备高功率激光模块、全内反射荧光 (TIRF) 系统和电子倍增电荷耦合器件 (EMCCD) 单光子敏感的倒置电动显微镜的载物台上(图1A )。 图1. 使用 STORM 对人脑样本进行超分辨率成像 STORM 在人脑切片中对神经丝 (NF) 免疫染色的皮层轴突的采集:首先获得传统的宽视场荧光显微镜图像 ...
因此,稀疏解卷积是通用荧光显微计算超分辨率成像算法,可被广泛应用于提升其他荧光显微模态分辨率,观察不同种类细胞器的精细结构及动态。 比如稀疏解卷积增强的商业超分辨转盘共焦结构光显微镜(SD-SIM),可以实现XY方向90纳米,Z方向250纳米的空间分辨率,清晰记录分裂期7μm深度内的全细胞内所有线粒体外膜网络(图3)。
多色受激辐射损耗超分辨显微技术(STED Nanoscopy)具有突破衍射极限的超高分辨率、成像速度快、无需特殊的闪烁荧光基团等优势,能够提供活细胞内生物分子的精确定位,是新兴的纳米尺度亚细胞研究重要工具。然而,活细胞多色STED显微技术的广泛应用仍然受限于缺乏抗漂白的荧光基团和复杂昂贵的成像设备。
在上述超分辨成像技术中,SIM具有宽视场、快速成像、光漂白和光毒性弱以及对荧光染料的非特异性需求等独特优势,因此特别适合于活细胞的长时程超分辨成像23–25。尽管有着诸多优势,SIM仍然受到一些技术上的挑战,其高质量超分辨图像的数值重建很大程度上依赖于对照明参数的精确估计,这些参数的微小误差会对重建结果产生重大...
超分辨荧光成像-FCS荧光相关光谱,该仪器为广东中科奥辉科技有限公司联合产品 荧光相关光谱(Fluorescence Correlation Spectroscopy,FCS)是一种对荧光信号随时间波动的规律进行自相关或交相关分析从而得到受测分子特性的一种技术,可以完成活细胞
1.通过调制照明光斑缩小系统的点扩散函数来实现超分辨 成像；基本思想是：在激发光斑点扩散函数周围套上一个环形点扩散函 数，以“擦除”激发光斑的外围，从而使得激发光斑“变小”。包括受激发损耗显微技术（STEM）;可逆饱和线性荧光跃（RESOLFT)；饱和结构光照明显微技术（SSIM）2.基于单个荧光分子的定位；虽然Abbe...
开发了一系列荧光偏振技术，如：（1）利用偏振特性的荧光偶极子超分辨技术(SDOM)发表在Light: Science and Applications期刊，并得到Nature Methods的高度评价；（2）参与将SDOM应用于金纳米粒子的SERS超分辨成像(Nanoscale 2018)；（3）开发偏振结构光照明显微术(pSIM)并发表在Nature Communications期刊，该技术以高的...