RT-PCR Kit(逆转录试剂盒)是专为两步法RT-PCR第一步实验配制的、具有高灵敏度的RT-PCR反应系统。该系统合理配备了与cDNA第一链合成反应相关的各种组分,优化的体系保证了M-MLV具有高效的逆转录酶活性,所得cDNA对后续的PCR或定量PCR实验兼容性好,可用于检测稀有基因的表达、从极少数细胞中定量检测特定mRNA的表达...
(4) 产物分析：通过琼脂糖凝胶电泳(RT-PCR)或荧光信号 (RT-qPCR)分析扩增效果。此外，一种将 RT-PC...
什么是实时荧光定量PCR (RT-PCR,qPCR)? 实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中,反应...
一. RT-qPCR 基本原理和概念实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 以cDNA 为模板进行 PCR,在 PCR 扩增过程中,通过收集荧光信号,对 PCR进程进行实时...
荧光定量RT-PCR法的基本原理是将DNA模板、引物和荧光探针等反应物混合,通过PCR循环放大检测靶基因的扩增情况。同时,荧光探针会针对扩增过程中特定的DNA序列,在扩增过程中实时释放荧光信号,被激光器反射和检测器捕获并传输到计算机上,计算机软件将荧光信号转化为数字图像,进而通过数据分析进行扩增曲线、相对丰度等指标的计算...
RT-PCR可以通过一步法或两步法的形式进行。 一步法即反转录和PCR扩增在同一管内完成,cDNA合成和扩增之间不需要打开反应管盖,有助于减少污染,操作方便快捷。而且反转录得到的所有cDNA都用来扩增, 所以灵敏度高,最低可达到0.01 pg总RNA。一步法RT-PCR 一般使用基因特异性引物起...
实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。想了解更多精彩内容，快来关注PCR检测试剂盒博湖 在Real-time PCR（实时荧光定量聚合酶链式反应）的广阔领域中，...
RT-PCR就是实时检测PCR每个循环扩增产物相对的荧光信号,来实现对起始模板进行定量及定性的分析。荧光实时定量PCR是通过多扩增反应中每一个循环产物的荧光信号进行实时监测,并分析指数期的扩增情况来实现对起始模板的定量分析。该技术使用的荧光来源包括荧光探针和荧光染料。前者是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物...
在RNA制备过程中,事实上不可能完全去除基因组DNA。因此,在qRT-PCR实验中有必要加入无逆转录酶对照(“非扩增对照“,还可记为NAC)。通常,NAC是一个模拟的逆转录反应,其中含有除逆转录酶之外的所有RT-PCR试剂。若在NAC中可观察到产物,通常意味着样品中残留有DNA。