一、荧光定量 PCR 原理 荧光定量 PCR(Real-time PCR),是指在 PCR 扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 以探针法荧光定量 PCR 为例:PCR 扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性...
荧光定量PCR是一种用于定量检测DNA分子数量的技术。其原理基于传统PCR技术,通过引入荧光探针和荧光素标记的引物来实现DNA数量的检测与测量。 在PCR反应中,首先将要检测的DNA样本与一对特定序列的引物进行反应。这两个引物分别与待检测的DNA片段的两端序列互补。当PCR反应进行到特定的温度时,引物会与DNA片段结合,作为复...
概述荧光定量PCR技术的原理。相关知识点: 试题来源: 解析 又称实时PCR技术。该技术在常规PCR基础上,添加了一条标有两个荧光基团的荧光双标记探针,一个标记在探针的5′端称为报告基团(Reporter,R);另一个标记在探针的3′端称为荧光抑制基团或称淬灭基团(Quencher,Q)。两者可构成能量传递结构,即5′端R发出的...
首先,荧光定量PCR的原理是基于PCR技术和荧光探针技术的结合。PCR技术是一种通过酶的作用,将DNA模板扩增成数以亿计的复制产物的技术。而荧光探针技术则是利用荧光探针与PCR产物结合后发出荧光信号的原理,实现对PCR产物的定量分析。 在荧光定量PCR中,首先需要设计引物和荧光探针。引物是PCR反应中的两个短链DNA,它们能够...
总的来说,荧光定量PCR的原理是基于PCR技术和荧光探针的结合,实现对PCR产物的实时监测和定量分析。通过合理设计荧光探针、选择合适的内参基因和进行严谨的数据分析,可以确保qPCR实验结果的准确性和可靠性,为基因表达分析、基因型鉴定、病原体检测等领域的研究提供有力支持。©...
实时荧光定量PCR技术不仅实现了对DNA模板的定量,而且具有灵敏度高,特异性和可靠性强,重复性好,自动化程度高、无污染性等突出优势,因此被公认为当今世界用于临床的最先进核酸分子诊断技术。PCR扩增的理论模式 PCR中,随着扩增周期的增加,模板以指数方式进行扩增。PCR 理论方程:N = N0 (1+E)nN: 扩增子数量N0: ...
荧光定量PCR(Quantitative Real-timePCR,qPCR)是一种在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 2.荧光定量PCR的原理 qPCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料。而qPCR的...
目录 收起 一、荧光定量PCR原理 荧光定量PCR基本原理是利用荧光探针在PCR反应中产生的荧光信号来检测...