荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)是较早发展起来的一门技术, 随着绿色荧光蛋白应用技术的发展,FRET已经成为检测活体中生物大分子纳米级距离和纳米级距离变化的有力工具,在生物大分子相互作用分析、细胞生理研究、免疫分析等方面有着广泛的应用。
荧光共振能量转移(FRET)多路复用技术 李剑超 陕西师范大学 荧光共振能量转移(FRET)是一种基于距离的光谱技术,可以用于研究生物分子的结构和动力学,以及开发新型的传感和成像方法。FRET的原理是,当两个荧光基团(供体和受体)的发射和吸收光谱有重叠时,供体在激发后可以将能量非辐射地转移给受体,从而改变两者的荧光强度和...
荧光共振能量转移技术FRET:当两个融合蛋白之间的距离在5-10nm之间范围内,那么供体CFP发出的荧光可被YFP吸收,并激发YFP发出黄色荧光。现在可通过测量CFP荧光强度的损失量来确信这两个蛋白是不是彼此作用。两个蛋白距离越近CFP所发出的荧光被YFP吸收的就越多,检测器所接收到的荧光就越少。反之,就可不能产生FRET效应。
荧光共振能量转移(FRET)技术 荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物,受到紫外光或蓝紫光照射时,可激发成为激发态,当从激发态恢复基态时,发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上,利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。荧光...
fret荧光共振能量转移技术 Fluorescence resonance energy transfer (FRET)是一种非常流行的技术,可以用来研究分子之间的相互作用以及遗传物质的表达。它被广泛用于生物学,分子生物学和化学研究,是应用最为广泛的分子技术之一。FRET技术的典型应用包括:分子的距离测量,组蛋白的分子间相互作用研究和探索遗传物质的表达。FRET...
自Fret荧光共振能量技术诞生以来,已结合多种先进的技术和方法,如电子显微镜,X射线衍射等,推动了分子生物学检测手段的发展。 1、作用原理 荧光共振能量转移技术,是采用物理方法去检测分子间的相互作用的方法。适用于在细胞正常的生理条件下,验证已知分子间是否存在相互作用。此方法的检测原理如下; (图1) 将我们要检测...
FRET实验步骤一般包括以下几个部分: 1.选择合适的荧光标记物:FRET实验依靠两个荧光分子之间的共振能量转移,因此需要选择合适的荧光标记物对。常见的是将一个发射波长较短的荧光素称为给体(Donor),另一个发射波长较长的荧光素称为受体(Acceptor)。 2.设计实验方案:根据需要研究的分子或体系,选择合适的实验方案。
荧光共振能量转移(FRET)是指当一个荧光基团(供体)的发射光谱与另一个基团(受体)的吸收光谱有一定的重叠,并且这两个荧光基团间的距离合适时(一般小于100Å,10nm),供体能量将向受体转移,简单地说,就是在供体基团激发状态下由一对偶极子介导的能量从供体向受体转移的过程,此能量转移过程不涉及光子的发射和重新吸收...
荧光共振能量转移 (FRET) 点击查看大图 FRET是测量两个不同位点之间距离以及距离变化的有效工具,其对距离的变化非常敏感,被称为“ 光谱尺 ”(spectroscopic ruler),其特征距离为1 - 10 nm。 如果一个荧光基团(供体)的发射光谱和另一个荧光基团(受体)的吸收光谱有重叠,那么当两者的距离在1 - 10nm之间时,供体...
解析 每个研究问题都有特定的标记方法,目标当然是能够满足FRET的条件. 下面给出几个例子: 二、FRET技术的应用随着生命科学研究的不断深入,对各种生命现象发生的机制,特别是对细胞内蛋白质-蛋白质间相互作用的研究变得尤...结果一 题目 请教关于荧光共振能量转移(FRET)中的标记方法有哪些?请不要给我讲FRET技术. ...