荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer，FRET）作为一种高效的光学“分子尺”，在生物大分子相互作用、免疫分析、核酸检测等方面有广泛的应用。在分子生物学领域，该技术可用于研究活细胞生理条件下蛋白质-蛋白质间的相互作用。蛋白质-蛋白质间相互作用在整个细胞生命过程中占有重要地位，由于细胞内各种...
荧光能量共振转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)是较早发展起来的一门技术，随着绿色荧光蛋白应用技术的发展，FRET已经成为检测活体中生物大分子纳米级距离和纳米级距离变化的有力工具，在生物大分子相互作用分析、细胞生理研究、免疫分析等方面有着广泛的应用。原理 荧光能量共振转移是距离很近的两个荧光...
荧光共振能量转移(FRET) 原理 作为一种高效的光学「分子尺」,荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)是采用物理方法去检测分子间的相互作用的方法,是指两个荧光发色基团在足够靠近时,当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态,在该电子回到基态前通过偶极子相互作用,实现了能量...
荧光共振能量转移（FRET）是一种在生物分子中发生的物理现象，其作用机制是当一个荧光分子吸收能量后，能量可以通过共振转移到一个相邻的分子上，使其激发并发出荧光。这种技术在生物学研究中被广泛应用，用于研究生物分子的相互作用和构象变化等。本文将介绍FRET实验的基本原理、实验步骤和在生物学研究中的应用。一、...
1948年，荧光共振能量转移（Fluorescence Resonance Energy Transfer，FRET）理论首次被提出，为研究者提供了在1.0-6.0nm范围内精确测定分子间相互作用的新方法。1967年，FRET理论得到实验验证，这一距离范围被称为“光学尺”，标志着分子生物学研究的重要里程碑。进入八十年代，FRET技术应用于蛋白质结构研究，并与其他...
在分子生物学领域,生物分析技术的进步是揭示生物分子间相互作用机理的关键。随着科学家们在这一领域不断深入研究,他们已经开发出多种技术手段,如免疫技术、X射线晶体衍射、核磁共振波谱学等,这些方法在理解分子间相互作用方面发挥了重要作用。1948年,荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)理论首次...
荧光共振能量转移(FRET)是一种利用荧光物质间非辐射能量转移进行光谱分析的方法。它发生在两个荧光基团之间,其中一个作为能量供体,另一个作为能量受体。如图2所示,供体的发射光谱和受体的吸收光谱必须有较大的重叠才能发生能量转移。此外,两个分子之间的距离和它们的方向也非常重要。FRET在两个有机荧光分子的距离为1到...
荧光共振能量转移 (fret) 是两个发色团(供体分子和受体分子)之间依赖于距离的能量转移。当靠近时,电子激发的供体生色团可以通过分子内长程偶极-偶极耦合相互作用以非辐射方式将能量转移到受体生色团。因此,能量的转移淬灭了供体的荧光强度并减少了其激发态寿命,同时增加了受体生色团的排放系数。由于 fret 的效率取...
FRET的检测原理即将两种荧光蛋白分别与两种目的蛋白融合表达,形成荧光供体蛋白与荧光受体蛋白,当两个融合蛋白之间的距离在5-10nm的范围内,则供体发出的荧光可被受体吸收,并激发受体发出荧光,此时通过测量供体荧光强度的损失量来确定这两个蛋白是否相互作用。两个蛋白距离越近,供体所发出的荧光被受体接收的量就越多,检测...