茜素红染色步骤 1. 成骨诱导分化结束后,吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基,用1×PBS轻柔洗涤2~3次。 2. 每孔加入2mL 4%多聚甲醛溶液(或10%福尔马林),室温固定30min。 3. 吸去固定液,用1×PBS轻柔洗涤2~3次,确保将固定液清洗彻底。 4. 每孔加入2mL茜素红工作液,室温染色5~10min。 5. 吸去茜...
1.培养皿用PBS冲洗2次,95%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗3次 2.0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3)37度,30min, 0.1%茜素红-Tris-Hcl(PH 8.3) 1g Tris(1g左右Tris均可) 加入三蒸水100ml中,用滴管往配制液中加HCl(分析醇),一滴滴地加,边加边测试PH,待PH为8.3左右即可(无精密PH测试仪,用PH试纸也是一样的,...
用蒸馏水冲洗。 染色: 将切片浸入茜素红染色液中,染色时间通常为5-10分钟。 用蒸馏水冲洗以去除多余的染料。 对比染色(如使用快速绿): 将切片浸入快速绿染色液1-3分钟。 再次用蒸馏水冲洗。 脱水、透明、封片: 通过递增浓度的酒精系列脱水(70%,95%,100%),每步5分钟。 使用二甲苯或其他透明剂透明处理切片,...
配制茜素红S染色液。通常是将茜素红S粉末溶解在调整pH至4.1-4.3的磷酸盐缓冲液中,浓度约为0.5-2%。 将切片浸入茜素红S染色液中,染色时间一般为15-30分钟,具体时间可能根据组织类型和期望的染色强度进行调整。 冲洗: 使用去离子水轻轻冲洗切片,以去除未结合的染料。 对照染色(可选): 为了更好地观察和对比,可...
一、茜素红S染色的操作步骤 1、吸去培养基并洗涤:在成骨诱导分化结束后,吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基,然后使用1×PBS轻柔洗涤2~3次。这样可以去除培养基中的成分,为后续的固定和染色做准备。 2、固定:每孔加入2mL 4%多聚甲醛溶液(或10%福尔马林),在室温下固定30分钟。多聚甲醛或福尔马林是常用的...
组织切片茜素红染色步骤 1、切片准备:首先,将组织切片切成适当厚度(通常为4-5微米),并将它们贴在载玻片上。接着,将载玻片放入60°C烤箱中烘烤大约30分钟,以便石蜡能够更好地附着到切片上。 2、去石蜡和水化:在水化过程中,切片会在二甲苯中经过两次处理,每次5分钟,以去除石蜡。随后,通过一系列浓度递减的酒精(...
鉴定钙结节的染色方法常用“茜素红”。 步骤: (1)吸去诱导液,再PBS 洗一到两次; (2)加入10%中性甲醛,固定30min-60min; (3)吸去固定液,加入0.1%的茜素红染色液,染色6-10min; (4)用PBS 洗两次,去处残留的染色液; (5)加入PBS,完成染色。
操作步骤：1.PBS清洗细胞样本。2.10%中性福尔马林或乙醇固定10-30min。3.吸去固定液，PBS清洗细胞样本两次。4.滴加茜素红S染色液，覆盖样本，染色1-5min。5.吸去染色液，PBS洗涤两次。6.镜下观察：钙沉积阳性细胞呈现桔红色。注意事项：1.试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面。2.茜...
茜素红半定量分析步骤 目的使用茜素红检测的方法,对细胞在成骨诱导和未诱导状态下,细胞基质中钙盐沉积情况进行半定量分析,研究细胞基质中钙盐沉积情况变化趋势规律,为临床实践提供理论参考。方法对4例正常人骨髓间充质干细胞及4例正常人脂肪间充质干细胞,使用茜素红半定量法检测成骨诱导及未诱导细胞基质中钙盐...
茜素红染色步骤 1. 成骨诱导分化结束后,吸去六孔板中的成骨诱导分化完全培养基,用1×PBS轻柔洗涤2~3次。 2. 每孔加入2mL 4%多聚甲醛溶液(或10%福尔马林),室温固定30min。 3. 吸去固定液,用1×PBS轻柔洗涤2~3次,确保将固定液清洗彻底。 4. 每孔加入2mL茜素红工作液,室温染色5~10min。