WB常见问题及注意事项 一、蛋白样本制备1、蛋白质的样品制备是Western Blot的第一步,WB待测组织净重与裂解液的体积比例为1g:10ml。同时,还应注意以下问题: (1)在合适的条件下,保持蛋… 医学小丽 干WB实验的6点经验 华仁医学科技 这些WB实验小细节你注意到了吗? WB实验中抗体的优劣是至关重要的一项,但是实验...
自噬研究新突破!WB揭秘 细胞自噬是细胞内一种重要的自我调节机制,对细胞存活和功能至关重要。为了深入研究细胞自噬,科学家们开发了多种实验方法,其中Western blot技术因其高灵敏度和特异性而备受青睐。在Western blot实验中,研究人员主要关注两种蛋白质:LC3-II和p62(SQSTM1)。LC3-II/I的比值以及p62蛋白水平是评估细...
自噬的WB检测指标的研究思路及方案 一、技术简介 1.微管结合蛋白1A/1B-轻链3的检测 目前使用最为广泛的自噬流检测方法是通过Westernblot检测 microtubule-associatedprotein1A/1B-lightchain3B(LC3B) 蛋白表达水平,但是如果没有自噬工具药作为对照,则观察到的 ...
LC3-I通过Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)参与的泛素样反应,使磷脂酰乙醇胺 (PtdEth,PE) 偶联,生成脂质化形式的 LC3,也称作 LC3-II,它可以附着到自噬体(autophagosome)的膜上,是自噬体的结构蛋白。在降解过程中,位于自噬溶酶体外膜的LC3-II被半胱氨酸蛋白酶Atg4B移除后回收,位于内膜的LC3-II则与包裹...
不胜感激一般用LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值作为鉴定自噬活性的指标，LC3-Ⅱ是由LC3-Ⅰ转化的，所以LC3-Ⅱ的增加...
上一期我们一起学习了细胞自噬相关的概念以及分子机制,今天我们就一起来学习一下自噬检测方法1电镜观察自噬体和溶酶体的超微结构哺乳动物自噬最早是在研究溶酶体时通过电镜发现的在超微结构下,自噬体是包裹有胞质组分(比如线粒体及片段化内质网)的双层膜结构。细胞特异性的自噬现象...
有没有跑p_mtor和mtor的 发自小木虫Android客户端
啊?lc3 升高二不是自噬增加的意思么 nono 师姐说得对,我记错了 赞(1) 回应 麒麟だいすけ 楼主 2021-11-01 01:05:36 也有可能是代偿性升高,有变化就有相关 昨夜风吹 那请问从wb里能分辨出是代偿性升高还是自噬增加吗 赞 回应 昨夜风吹 2021-11-01 01:16:29 那请问从wb里能分辨出是代偿性升...
目前,Western Blot是常用的LC3B检测方法,但是已有的WB抗体无法区分LC3B-I和LC3B-II,均相免洗的HTRF LC3B-II 检测试剂盒,在简化实验流程的同时,更进一步提升了LC3B-II检测的灵敏度和特异性。 特异性检测LC3B-II的HTRF模型 细胞用自噬抑制剂HCQ (羟化氯喹)处理4小时,弃培养基并裂解,分别取16ul裂解物用于HTRF 及...
LC3-I通过Atg7 和 Atg3(分别对应 E1 和 E2 样酶)参与的泛素样反应,使磷脂酰乙醇胺 (PtdEth,PE) 偶联,生成脂质化形式的 LC3,也称作 LC3-II,它可以附着到自噬体(autophagosome)的膜上,是自噬体的结构蛋白。在降解过程中,位于自噬溶酶体外膜的LC3-II被半胱氨酸蛋白酶Atg4B移除后回收,位于内膜的LC3-II则与...