美国芝加哥大学的研究人员使用遗传学和化学手段,证明自噬是高转移性肿瘤细胞能动性和入侵所必需的,并通过抑制自噬,有效阻断肿瘤细胞迁移和肿瘤模型中乳腺癌转移(Marina N. Sharifi et al, 2016)。 自噬与心血管疾病 自噬对维持心脏功能具有重要作用,自噬水平改变伴随着许多心血管疾病的进展过程中,如心肌缺血/再灌注(...
自噬在细胞周期调控中的实验模型 自噬定义与功能 自噬定义与功能 ▪自噬的定义 1.自噬是一种生物体内发生的自身降解过程，通过吞噬体对细胞内受损或不必要的组分进行清除。2.自噬是细胞内质网、高尔基体和溶酶体等细胞器共同参与的过程。3.自噬对于维持细胞内环境的稳定具有重要作用。▪自噬的功能 1.自噬有助于...
近日,研究人员在Autophagy上发表研究成果,报道利用人诱导多能干细胞(hiPSCs)构建了人心肌细胞线粒体吞噬模型,为进一步理解线粒体自噬提供了良好的研究模型。 hiPSCs是一类具有多向分化潜能的细胞,研究人员利用hiPSCs生产心肌细胞(hiPSC-CMs)。随...
在发现自噬高水平组织中存在显著富集的巨噬细胞后,作者打算研究巨噬细胞与具有不同自噬水平的肿瘤细胞之间的相互作用。首先,根据单细胞RNA测序的基因表达情况,为来自七个肿瘤组织的每个肿瘤细胞分配了一个自噬评分。UMAP图显示不同亚型的自噬评分不同(图4A、B),表明这些细胞处于不同的自噬水平。根据自噬评分,将肿瘤细...
自噬是一种与许多生理和病理过程有关的常见生命活动现象,参与生命科学研究的众多方面,比如肿瘤、炎症、免疫应答、氧化应激等。近几年,自噬研究的热度不减,国自然相关研究的中标数量也呈增长趋势(图 1),自日本科学家大隅良典发现细胞自噬机理被授予诺贝尔生理学或医学奖以来,自噬研究的热浪更是推向了一个新的高度。
Western blot和激光共聚焦显微镜均证明Rapamycin可以诱导自噬的发生。透射电镜细胞超微结构的观察表明Rapamycin可以有效地诱导HaCaT-LC3细胞自噬的发生。结论:成功构建GFP-LC3稳定表达的HaCaT系,该细胞系可以作为研究人角质形成细胞自噬功能的一种细胞模型。 展开
物理方法构建肝细胞自噬模型 朱学敏
目的: 1.建立一种XOD诱导的细胞自噬模型; 2.探讨XOD诱导自噬模型过程中线粒体氧化应激作用及分子机制. 方法: 1.体外培养L-02细胞,采用不同浓度氧化剂(H2O2,GOX,t-BHP,PQ和XOD),自噬诱导剂(EBSS和Rapamycin),自噬抑制剂(3-MA)以及多种抗氧化剂(NAC,和MitoQ)对细胞进行处理; 2.采用免疫荧光检测自噬标志...
目的探讨饥饿诱导的人胚肾细胞(HEK293)自噬模型的构建.方法采用Earle's平衡盐溶液(EBSS)分别处理HEK293细胞0,1,2,4,8 h,显微镜下观察细胞形态变化,蛋白免疫印迹法检测自噬微管相关蛋白轻链(LC)3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62的表达;双荧光mRFP-e GFP-LC3(ptf LC3)质粒转染HEK293细胞24 h后,荧光显微镜观察EBSS饥饿条件下细...
谷氨酸诱导大鼠结肠 Cajal 间质细胞构建自噬模型