自噬(Autophagy)是一个通过膜将部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等组分包裹起来形成自噬体,然后与溶酶体融合形成自噬溶酶体,最终降解其所包裹的内容物的过程。 自噬发生的几个阶段[自噬流] 自噬泡(phagophore)的发生; 自噬体(autophagosome)的形成; 自噬的运输融合(fusion):自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体 ...
自噬流是指自噬体从形成到与溶酶体融合再到降解的整个过程,检测自噬流可以反映自噬的动态变化和功能状态目前,检测自噬流的方法主要有以下几种: 1、电镜观察:利用透射电镜可以直接观察自噬体的形态和数量,但是…
但只是单纯的检测自噬小体或者LC3修饰的变化，并不能完全表示自噬活性的增加，因为这既有可能是由于自噬诱导的发生，也有可能是自噬下游步骤被抑制的结果。因此要准确分析自噬活性，就必须评估自噬的动态变化，即“自噬流”（Autophagic Flux）。自噬流目前常用的检测方法有GFP-LC3-RFP-LC3ΔG。GFP-LC3在自噬溶酶体中...
自噬流(Autophagic Flux)是细胞自噬过程的一个核心概念,它描述了从自噬体的形成、自噬底物的降解,到降解产物的再利用这一连续过程。自噬是一种细胞内的降解途径,通过这一过程,细胞可以将受损的细胞器、错误折叠的蛋白质或其他细胞内组分包裹在双层膜结构的自噬体中,并运送到溶酶体进行降解,从而实现物质的循环利用和细...
LC3II/LCI比例的变化可以反映自噬过程的启动。LC3是参与自噬形成的关键分子，自噬体形成时，胞浆型LC3（即LC3-I）会酶解掉一小段多肽，转变为自噬体膜型（即LC3-II）。LC3-II水平的升高表明自噬过程的启动。另一个常用的自噬检测指标是P62。P62是一种泛素结合蛋白，通常在自噬过程中被降解。因此，P62...
@长春金传科技荧光标记转染测自噬流 长春金传科技 荧光标记转染测自噬流是一种有效的检测细胞自噬过程的方法。具体来说,可以通过构建带有荧光蛋白标记的载体,如mRFP-GFP-LC3双荧光标记系统,来追踪LC3蛋白以及自噬流的变化。当自噬发生时,可以通过荧光显微镜观察到荧光蛋白的聚集和转位,从而判断自噬活动的强弱和进程。
自噬是过程，自噬流是强度。自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新；自噬流是2018年公布的生物物理学名词。定义一定时间内自噬过程发生的强度。自噬和自噬流的区别：自噬是过程...
细胞自噬流数据统计分析 细胞自噬是一种细胞内的代谢过程,涉及到多个相关蛋白质和信号通路,因此流数据统计分析可以帮助我们更全面地了解细胞自噬过程。以下是可能需要进行的流数据统计分析: 1. 细胞自噬相关蛋白质表达:使用Western blot等方法检测细胞中自噬相关蛋白质(如LC3、p62、Beclin-1等)的表达水平,对比实验组和...
报告基因发出红色和绿色的荧光，图像重合时，自噬体将显示黄光。然而，在自噬溶酶体的酸性环境中，GFP荧光迅速淬灭，只留下红色荧光信号。诱导自噬后，黄光（表示更多的自噬体）和红光（表示更多的自噬体）增加。然而，当自噬流由于溶酶体抑制而减少时，黄光占比较高，这表明自噬体-溶酶体融合和/或在自噬溶酶体内...
在操作过程中, 通常可同时观察可溶性p62 蛋白、不可溶性p62 蛋白和LC3B-I/II 转化综合判断自噬流状态。若是可溶性p62 蛋白减少, 不可溶性p62无明显改变, 同时LC3B-I 向LC3B-II 转化增加则表明自噬流活化; 若观察到可溶性p62 蛋白减少, 但不可溶性p62 明显增加, 则无论LC3B 是否发生I 型向II 型的转化均代表了...