本申请还提供一种检测脱靶效应方法应用,将权利要求1～7中所述的检测脱靶效应方法应用于检测细胞中脱靶情况。 进一步地,所述方法应用于在hek293t和mcf7细胞中检测ascpf1-site6以及cas9-emx1的脱靶情况。 进一步地,所述方法应用于在hek239t细胞中检测野生型spcas9、espcas9高保真版本和cas9-hf高保真版本在基因位点emx1...
摘要: 脱靶效应是CRISPR介导的基因编辑技术中存在的一个重要问题.最近,Zuo等人开发了GOTI(Genome-wideOff-targetanalysisbyTwo-cellembryoInjection)技术能够检测基因编辑工具的脱靶,该方法可以避免其他脱靶检测方法容易受到个体SNPs(Single-NucleotidePolymorphisms,单核苷酸多... 查看全部>>关键词:...
摘要:本申请公开了一种检测脱靶效应方法及其应用。所述方法涉及一套可以检测CRISPR‑Cas脱靶效应的建库流程,内容包括转染试剂的更换,ODN序列的优化,Adaptors的改进,Primers的改善和PCR方法的简化,以及所述方法在CRISPRCas基因编辑系统中的应用。一种检测CRISPRCas系统脱靶效应的方法,可以实现低门槛,高通量,适合更多普通实...
7.根据权利要求5所述的检测脱靶效应方法,其特征在于,所述tag的read2序列中tag与基因组dna接头还具有接头碱基gat或ca特征。 8.根据权利要求1所述的检测脱靶效应方法,其特征在于,所述步骤3)中adaptors包括引物和寡核苷酸。 9.一种检测脱靶效应方法应用,其特征在于,将权利要求1～7中所述的检测脱靶效应方法应用于检测...