间充质干细胞目的 采用患者来源的胶质瘤组织进行原代培养,对胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSCs)和肿瘤性间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)进行了分选和鉴定.探讨GSCs和MSCs对胶质瘤的生长,耐药等的作用.方法 取高级别胶质瘤手术标本剪碎后使用Ⅱ型胶原酶消化为单细胞悬液.一部分使用GSCs培养基成球悬浮...
人脑胶质瘤干细胞的培养及分离方法
一种简化改良的脑胶质瘤干细胞培养方法
[0011]优选的,所述成球的胶质瘤干细胞的制备方法为:胶质瘤细胞(U87细胞株或原代胶质瘤细胞091214)用含10%胎牛血清(Gibco, 10099-133)的DMEM培养基(Gbico)培养2-3天后将培养基吸弃,加入PBS(购自北京中杉金桥生物技术有限公司)清洗后吸弃,重复PBS清洗2-3次,然后加入1ml干细胞培养基进行培养,此后每天采用半换...
1.本发明涉及生物学和肿瘤学领域,具体地涉及一种快速有效获得高纯度胶质瘤干细胞培养的方法。 背景技术: 2.脑胶质瘤是最常见、最恶性的原发性脑肿瘤。恶性胶质瘤患者常因耐药和复发而预后较差。肿瘤干细胞参与胶质瘤的发生、发展、耐药和复发。因此,快速鉴定和有效了解胶质瘤干细胞对于治疗策略和疗效具有重要意义。
本发明提供一种胶质瘤干细胞体外分离培养的方法及培养基,其方法步骤包括:第一步:将细胞瘤组织加入PBS缓冲液;去除血块及坏死细胞,剪碎至糜状;第二步:加入Accutase溶液,使组织块消化呈细胞悬液;第三步:加入GC胶质瘤瘤细胞培养基进行混匀,终止消化;并细胞悬液经滤网(BD)过滤,获得单细胞悬液;第四步:加入PBS再次...
免疫细胞化学检测显示肿瘤球细胞表达胶质瘤干细胞的标志物CD133,诱导分化后的肿瘤球细胞可以表达成熟神经细胞的标志物GFAP和TU-20.以上结果证明培养出的肿瘤球细胞即为脑胶质瘤干细胞.结论:用无血清干细胞培养基对脑胶质瘤组织进行处理培养,用条件培养+连续传代的方法即可快捷高效地获得大量高纯度脑胶质瘤干细胞.此方...
本发明利用三维胶原支架在低血清浓度下完成胶质瘤干细胞的富集培养,为胶质瘤体外试验研究提供了一种新型的,更接近体内真实环境的干细胞培养方法及应用.所述三维培养方法中选用胶原作为制作3D支架的材料,胶原是细胞外基质最主要的成分,可为细胞提供良好的粘附与迁移环境,并具有良好的生物相容性,机械强度,降解系数和低...
本发明提供了快速有效获得高纯度胶质瘤干细胞培养的方法.具体地,本发明方法包括:(a)提供胶质瘤组织样本;(b)对胶质瘤组织进行碎化处理,形成泥状组织样品;(c)对泥状组织样品进行消化,使细胞发生解离,从而获得含消化产物的第一混合物;(d)离心分离,获得细胞沉淀物;(e)将所述沉淀物在特定培养基中,在包被的培养...