<一>肿瘤分离(以皮下成瘤或乳腺原位成瘤为例)... 1 <二>制备肿瘤细胞悬液... 1 <三>percoll分离免疫浸润淋巴细胞(肿瘤中免疫细胞很少,一般不需要用percoll分离,直接染色)... 2 <四>细胞染色(以下步骤每个体系为一个肿瘤组织)... 2 2、激活阻断:... 2 ...
胸腺瘤起源于胸腺上皮细胞,是最常见的前上纵隔原发性肿瘤。对于胸腺瘤组织的单细胞悬液一般使用美天旎公司的肿瘤组织试剂盒制备。 胸腺组织示意图 二、实验仪器及耗材 三、实验步骤 1. 准备肿瘤解离试剂盒的酶混合液,将100µL的H酶、500 µL的R酶和25 µL的A酶加入到4.4mL RPMI 1640培养基中。 2. ...
1.用剪刀将组织切割成1-2 mm³左右的小块,用4℃ D-Hank's液洗1次,尽量去除剪碎组织过程中产生的组织碎片。 2.样品管内加入200-500 mg组织及消化酶,放入单细胞悬液仪,选择内置程序运行。 3.消化完成后,适当震荡样品管,观察浑浊度与颜色,并用细胞筛过滤出单细胞悬液,随后加入消化终止液,最终得到细胞悬液...
本发明属于细胞悬液制备技术领域,且公开了一种肿瘤组织高质量单细胞悬液制备的方法,S1.在离心管中用配置DMEM配制解离混合酶;S2.将肿瘤组织转移至加入DMEM培养基的培养皿中并将肿瘤外的非目标组织剔除干净,再肿瘤组织剪切成2mm直径大小的组织块,用PBS缓冲液清洗1‑2次;S3.吸取肿瘤组织颗粒至配制好解离混合酶的...
(4)单细胞悬液的制备:每30 min使用1 mL移液器吹吸组织块1次,至吹吸无明显阻碍视为消化彻底, 用100 μm筛网过滤除去杂质,并使用大体积约50 mL的HBSS缓冲液洗涤一次,300 g离心5 min,弃上清,补加适当体积的HBSS缓冲液或PBS缓冲液重悬细胞沉淀,即为肿瘤单细胞悬液; ...
新鲜肿瘤组织单细胞悬液的制备方法董敬朋,陈艺华,张素娟单细胞悬液在肿瘤病理,肿瘤分子生物学行为等研究方面均有广泛用途,如乳腺癌的癌细胞倍体测定应先制备单细胞悬液,PCR技术用于某些肿瘤的诊断或其他疾病诊断也可先制备单细胞悬液,然后再提... 关键...
本实用新型提供一种小鼠肝癌肿瘤组织单细胞悬液制备装置.所述小鼠肝癌肿瘤组织单细胞悬液制备装置包括上壳体,所述上壳体的一侧开设有注液口;下壳体,所述下壳体固定安装在所述上壳体的底部,所述下壳体的内壁上开设有滑动槽;密封盖,所述密封盖螺纹安装在所述注液口上;四个支撑杆,四个所述支撑杆呈矩阵固定安装在...
制备单细胞悬液的实验步骤: 1.在实验开始前,我们需要提前准备好单细胞制备仪JX-CKSM-6WK一台,温和型消化酶,终止液和洗涤管 2.在实验前,需要先将消化液和终止液冷水慢慢解冻,不可加热,不可剧烈摇晃;解冻后的消化酶和终止液放在冰上待用 3.选取健康小鼠1只,断颈处死,打开腹腔,取出肿瘤,放置冰块上 ...
从石蜡包埋肿瘤组织提取的细胞核可以用于流式细胞仪检测肿瘤细胞DNA的含量,DNA图像定量及荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)分析等实验.以往从石蜡包埋组织中提取细胞核的方法是将组织消化后得到的细胞悬液及未消化的块状组织用200目的细胞筛进行分离,除去未被消化的组织,该法不仅增加细胞悬液被污染的...