考马斯亮蓝G-250分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作 用,两者互作的结果使G-250分子的最大光吸收从465nm转移至595nm。在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最大光吸收来确定蛋...
蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg/mL，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。考...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比...
1、考马斯亮蓝G250法测定蛋白浓度(bradford法) 1)实验原理 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。考马斯亮蓝G-250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度...
考马斯亮蓝G-250染色法测定染色法测定考马斯亮蓝蛋白质含量 【实验目的】学习掌握考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理和方法。【实验原理】考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合则呈现蓝色。染料的最大吸收从465nm变为595nm，蛋白质－染料复合物具有很高的消光系数，因此蛋白质测定的灵敏度较高，...
教给你一种新配法 染色液配制: 1 mol/ L 盐酸溶液(A) ,1 g/ L CBB G250 溶液(B) ; 应用时用1 ml A 液和15 ml B 液混合加水至1 L , 搅拌混匀。 注意,关键所在是应用的时候再混合,不要配好等着染色。就不会出现你说的那种现象了。 百试百爽! 分析总结。 查了很多文献游离考马斯亮蓝颜色为...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,...
考马斯亮蓝G250法是一种常用的蛋白质定量分析方法,其具有操作简便、灵敏度高、重复性好等优点。 考马斯亮蓝G250是一种酸性染料,在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在465nm处。当它与蛋白质结合后,变为蓝色,最大光吸收随之转移至595nm处。这种颜色的转变是由于蛋白质与染料结合形成了复合物。 具体来说,考马斯...
考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合迅速，大约2分钟即可完成反应并达到最大光吸收，这一过程在1小时内保持稳定。之后，蛋白质-染料复合物会聚合并沉淀，一般建议在反应5分钟后开始测定。选择的标准品应通过凯氏定氮法精确测定蛋白纯度，随后用NaCl溶液或蒸馏水稀释至每毫升含100μg标准蛋白。最好使用去离子水...