考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比...
考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比...
实验四 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量
在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。 考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过范德华键结合后,变为蓝色,且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律,可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈最大光吸收,至少...
蛋白质含量测定(考马斯亮蓝G-250法)一、目的考马斯亮蓝(Coomassiebrilliantblue)G-250法是比色法与色素法相结合的复合方法,由Bradford于1976年建立,具有简便快捷,灵敏度高,稳定性好等特点,是一种较好的蛋白质定量测定常用方法。通过本实验学习应用该法测定蛋白质含量的原理,复习分光光度计的使用及标准曲线的绘制等...
考马斯亮蓝G-250是比色法与色素法相结合的复合方法。考马斯亮蓝G-250是一种染料,在游离状态下呈棕红色,当与蛋白质结合后呈青蓝色。在一定范围内,也就是蛋白质含量在0~1000ug范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,所以可用比色法测定。 2、考马斯亮蓝G-250法有常量法和微量法...
考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者*大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成...
试剂ml不同浓度标准蛋白质溶液010101010101蒸馏水01考马斯亮蓝染色液50505050505050蛋白质含量20406080100充分混匀静置2min595nm处以管蛋白质含量为横坐标对应吸光度值为纵坐标绘制标准曲线根据标准曲线对照第管待测样品吸光度值查出其蛋白质含量 考马斯亮蓝 G-250 染料结合比色法测定蛋白质含量 【目的】 1 . 掌握考马...
考马斯亮蓝G―250 100mg溶于50ml95%乙醇中,加入100ml85%磷酸,用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G―250,4.7%(W/V)乙醇。二、标准和待测蛋白质溶液 1(标准蛋白质溶液 结晶牛血清蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度用0.15mol/LNaCl配制成1mg/ml, 0.1mg...