1、绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆和表达背景知识绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光。它产生荧光无需底物或辅因子。发色团是其蛋白质一级序列固有的。GFP 由3 个外显子组成,长2.6kb;GFP 是由238...
(GFP)基因的克隆和表达 背景知识 绿色荧光蛋白(green fluoresce nt protein,GFP)是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔 肠动物体内的生物发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP发射绿色荧光。它产生荧光无需 底物或辅因子发色团是其蛋白质一级序列固有的。GFP由3个外显子组成,长2.6kb;GFP是 由238个氨基酸所组成...
coLi BL-21大肠杆菌感受态细胞中,经IPTG诱导目的基因表达产生绿色荧光蛋白。 关键词:绿色荧光蛋白 PCR 基因克隆 表达 1.前言 1.1绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP) 绿色荧光蛋白是一类存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔肠动物体内的生物 发光蛋白。当受到紫外或蓝光激发时,GFP 发射绿色荧光[1]。 1.2 GFP ...
1987年,道格拉斯•普莱沙(Douglas Prasher)克隆出了GFP的基因序列。1993年,在普莱沙的基础上,马丁•沙尔菲(Martin Chalfie)成功地通过基因重组的方法使得除水母以外的其他生物(如大肠杆菌等)也能产生GFP,这不仅证实了GFP与活体生物的相容性,还建立了利用GFP研究基因表达的基本方法,而许多现代重大疾病都与基因表达的异...
1、绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆、表达和粗提取南方医科大学2011预防医学(卫生检验检疫) 摘 要目的:研究绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因在大肠杆菌中的基因克隆与重组表达,以及对其进行粗提取。 方法:从E.coli DH5中用碱提取质粒的方法提取质粒pEGFP-N3和质粒pET-28a。然后用质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳...
绿色荧光蛋白GFP基因的克隆表达和粗提取1/18绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆、表达和粗提取南方医科大学2011预防医学(卫生检验检疫)摘要目的:研究绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因在大肠杆菌中的基因克隆与重组表达,以及对其进行粗提取。方法:从E.coliDH5ɑ中用碱提取质粒的方法提取质粒pEGFP-N3和质粒pET-28a...
由于 GFP 荧光是生物细胞的自主功能, 是一种现成的荧光蛋白质,荧光的产生不需要任何外源反应底物,因此 GFP 作为一种广泛应用的活体报告蛋白,其作用是任何其它酶类报告蛋白无法比拟的。本实验是利用实验室提供的质粒 pEGFP-N3,其结构如图三所示.其上有所用酶的酶切位点。1.2 基因的克隆与表达 基因克隆(分子克隆 ...
用IPTG诱导GFP基因表达可以看到浅绿色菌落。最后对绿色荧光蛋白进行粗提取。结论:本实验有助于学生掌握最基本的分子生物学实验技术,为进一步的实验奠定基础。 关键词:绿色荧光蛋白基因克隆重组表达转化粗提取 1 前言3 2 实验目的4 3 实验设备4 4 材料及试剂5 5 实验操作步骤5 5.1 操作流程5 5.2 质粒DNA的分离与...
绿色荧光蛋白(GFP)基因的克隆.表达和粗提取南边医科大学2011预防医学(卫生磨练检疫)摘要目标:研讨绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因在大肠杆菌中的..