细菌转化是指受体菌直接吸收供体菌的DNA片段,并获得供体菌的部分遗传性状的过程。在转化实验中,通常使用质粒载体作为目的基因的载体,将目的基因与质粒载体连接,然后通过转化方法将重组质粒导入受体菌,从而实现目的基因的转化。 三、实验材料 1. 菌株:供体菌株(如E.coli DH5α)、受体菌株(如E.coli BL21) 2. 质粒...
步骤1.将4-5 mL LB液体培养基(注意,此LB液体培养基不是第一日使用的LB琼脂)和2-2.5 μL的Zeocin(此处以Zeocin为例,应根据DNA质粒的耐药性更换对应抗生素)按照1:1000或1:2000的比例加入细菌培养管中。 步骤2.每个培养皿最好用移液枪枪头选择3个菌落,分别放入3个培养管中。 步骤3.松开盖子用胶带松动地固...
(8) 在涂好的培养皿上做上标记,先放置在37℃恒温培养箱中30-60min直到表面的液体都渗透到培养基里后,再倒置过来放入37℃恒温培养箱过夜。(9) 在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇,擦干桌面,写实验报告。(10)观察平板上长出的菌落克隆,以菌落之间能互相分开为好。注意白色菌斑。
细菌转化是指将一种细菌细胞内的遗传物质转移到另一种细菌细胞中,使后者获得前者的一些遗传特性。实验中,利用肺炎双球菌作为实验材料,通过比较转化前后的菌落特征,验证DNA作为遗传物质的作用。 三、实验材料 1. 肺炎双球菌(S型菌和R型菌) 2. DNA提取试剂盒 3. DNA连接酶 4. 载体DNA 5. 转化试剂 6. 培养基...
📖首先,让我们来看看如何制作细菌培养板。以LBA培养板为例,你需要将40g LBA粉末溶解于1L水中,混合均匀后进行高压灭菌。待冷却至手背可试温时,加入抗生素(如Ampicillin)以防止细菌污染。🔬接下来,是时候挑选感受态细胞了!E.coli是最常用的菌株,其中Top10、DH5α等都是不错的选择。它们天生易于吸收外源基因,是...
细菌转化是指细菌在自然条件下或人工诱导下,将外源DNA片段(如质粒)摄取并整合到自己的基因组中,从而获得新的遗传特性。细菌转化实验是研究基因转移和基因工程的重要手段之一。 三、实验材料 1. 菌种:大肠杆菌(E. coli) 2. 质粒:pUC19 3. DNA分子:质粒DNA 4. 转化试剂:钙离子(CaCl2) 5. 培养基:LB培养基、...
三、细菌转化实验操作步骤:(1)预先将恒温水浴的温度调节至42°C。(2)从-70°C超低温冰箱中取一管(100μl)合格细菌,立即用手指加热使其融化,然后将其插入冰,冰浴中5-10min。(3)加入5μl连接的质粒混合物(DNA含量不超过100ng),轻轻摇动并置于冰上20分钟。(4)轻轻摇动后,插入42°C水浴中1-...
一、细菌转化实验实验方法原理: 细菌转化实验中质粒DNA粘附在细菌细胞的表面,并在42°C进行短时热休克处理,以促进DNA的吸收。然后将其在非选择性培养基中培养一代。质粒上携带的抗生素基因表达表达后,不含抗生素的培养基在培养基中生长。 二、细菌转换实验所需材料:1.涡旋混合器 2.微量移液器采样器 3.移液器吸...
实验细菌转化 实验细菌转化 contents 目录 •实验简介•实验步骤•实验结果分析•实验注意事项与安全•实验应用与拓展 01 实验简介 细菌转化的定义 •细菌转化:指将一个细菌的DNA转移到另一个细菌体内,并使后者获得前者的某些遗传特性。实验目的和意义 目的 研究细菌转化的机制和过程,探索基因转移和重组的...
细菌转化实验通过将外源DNA导入细菌细胞,激发细菌细胞的遗传转化能力,获得具有新性状的转化子细菌。这一过程是合成生物学和遗传工程的基础,为进一步的基因操作和DNA克隆提供了基础。实验目的探讨细菌基因转化的机制通过实验了解细菌转化的基本过程,掌握细菌接受外源DNA并将其整合到自身基因组中的机制。培养诱导感受态细菌学习...