细菌种属鉴定是微生物学的基础操作,搞清楚手里的细菌到底是谁,才能对症下药。做这件事就像查户口,得用多重证据交叉验证,下面说几个常用方法,注意每个方法都有优缺点,得根据实际情况灵活组合。 从最直观的形态观察开始。把菌液涂在载玻片上,用酒精灯火焰固定后,滴加结晶紫染色1分钟,水冲干净再滴碘液媒染1分钟。酒精脱色这步最关键,
细菌种属鉴定的核心步骤需覆盖表型与基因型特征:1. **形态学观察**:包括菌落颜色、大小、边缘形态等表观特征,以及革兰氏染色、孢子染色等显微形态;2. **生理生化试验**:通过代谢特性差异(如氧化酶反应、糖发酵能力、特定底物分解能力)区分近缘种;3. **分子生物学鉴定**:16S rRNA基因序列比对是标准方法(相似度...
用16S rDNA 方法鉴定细菌种属 一、目的 1. 掌握 16S rDNA 对细菌进行分类的原理及方法; 2. 掌握 DNA 提取、PCR 原理及方法、 DNA 片段回收等实验操作。 二、原理 随着分子生物学的迅速发展, 细菌的分类鉴定从传统的表型、 生理生化分类进入到各种基因型分类水平,如 (G+C)mol% 、DNA 杂交、rDNA 指纹图、...
(1)DNA碱基组成的测定:细菌间DNA分子同源程度可以用细菌DNA分子的G+C或A+T摩尔百分比来反映。亲源关系越近的细菌,G+Cmol%越相近。G+Cmol%含量不同的细菌,为不同种细菌;含量相同的可能为不同种的细菌。不同菌属问G+Cmol%范围在25%~75%之间。细菌的G+Cmol%相当稳定,不受培养条件、菌龄...
16S鉴定细菌的种属 利用16SrDNA鉴定细菌的种属 精品课件 1.什么是16SrDNA?➢16SrRNA为原核生物核糖体RNA的一个亚基,16SrDNA就是 编码该亚基的基因。➢原核生物的rRNA含有3种类型:23S、16S、5SrRNA,它们分 别含有2900、1540和120个核苷酸。2.用16SrDNA进行细菌鉴定的原因➢16SrDNA在原核生物中普遍存在。
用16SrDNA方法鉴定细菌种属.pdf,用1 6S rDNA 方法鉴定细菌种属 一、实验目得 1. 掌握 16 SrDNA 对细菌进行分类得原理及方法; 2 。 掌握 D NA 提取、PCR 原理及方法、DN A片段回收等实验操作。 二、实验原理 细菌rRNA(核糖体 RNA)按沉降系数分为 3 种,分别为 5S
用16S-rDNA方法鉴定细菌种属 16SrRNA的编码基因是16SrDNA,但是要直接将16SrRNA提取出来很困难,因为易被广泛存在的RNase降解,因而利用16SrDNA鉴定细菌,其技术路线如下: 细菌基因组的提取: PCR的基本原理: PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--...
通过软件将待测微生物与数据库参比,得出鉴定结果。(3)分子生物学鉴定 提取细菌基因组DNA,然后PCR扩增16srDNA片段并测序,将结果与GeneBank或者Eztaxon对比分析,一般序列相似度在97%以上就可以认为是同种细菌,该方法也是目前微生物分类学研究普遍采用的鉴定方法。——源自百度百科 ...
比如:形状 ,即:球菌、杆菌和螺旋菌。生活方式,分为两大类:自养菌和异养菌。对氧气的需求,分为需氧和厌氧细菌。生存温度,有喜冷、常温和喜高温三类。以及细菌结构方面的部分特殊性。用传统分类法,就是按上面的特点,一级级向下分类,科、属、种水平的分类主要依靠生化特性和抗原结构。另外,就是...
鉴定的一般步骤 细菌基因组的提取特异引物扩增16SrDNA序列验证PCR产物扩增是否成功 选取近似菌种序列构建系统发育树 与数据库中已知细菌比较获得样品种属信息 DNA测序获得16SrDNA序列 1.弃尽培养液,向培养皿中加入650μl的SolutionA,室温静置1分钟。2.用移液枪的取650μl的细胞悬浮液转移至...