细胞转染分为瞬时转染和稳定转染,其中,瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,基因表达维持时间较短,通常在96h以内;稳定转染是指DNA整合到宿主细胞的染色体中,使宿主细胞可长期表达目的基因。目前,大多采用依据不同质粒载体含有的抗性标志选用相应的抗生素对靶细胞进行筛选,常用...
目前细胞转染主要有物理、化学和生物三种方法。关于物理转染,一般实验室无法满足相关的硬件要求,因为这种方法需要特定的仪器耗材;另外物理转染需要充分的转染参数测试,才能获得较好的转染效果。化学转染是目前进行细胞转染较为通用的方法,这种方法价格便宜、操作简单。不过有些细胞对化学转染不敏感、转染效率低,这种细胞便可...
必须根据您的细胞类型(贴壁细胞、悬浮细胞)、外源核酸种类(DNA、RNA)、基因表达时间、细胞毒性、转染效率等,操作是否简便等因素,挑选出最理想的转染试剂。 图2. 不同转染方法的原理和优点 在细胞转染过程中,即使选对了合适的细胞转染试剂,还是不可避免会出现各种令人头疼的问题,例如,转染效率低,细胞死亡,重复性差等...
进行实验之前,请先规划好实验,一般细胞转染需要24h-72h,所以要充分了解细胞生长速度,计算所需脂质体和DNA的储备量,并确认准备好所需试剂:Opti-MEM无血清培养基,Lipofectamine转染试剂,以及DNA,这个一定要确认好。 1、细胞铺板 (1)一般会选择复苏细胞传代3-4次(汇合率达到90%...
图2.细胞转染示意图[4] 稳定转染和瞬时转染有何异同 相同点:针对质粒DNA,不论是瞬时转染还是稳定转染,都可以通过物理法(电转、显微注射、基因枪),化学法(阳离子脂质体,阳离子聚合物、磷酸钙),生物法(病毒介导)进行转染;并且转染环节的操作基本一致。
细胞转染是将外源DNA或RNA导入真核细胞,用来研究真核细胞基因功能、基因表达调控和蛋白质表达的专门技术。 细胞转染示意图 根据实验目的,细胞转染技术分为两大类,分别为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,不整合到宿主染色体上,以游离的形式存在,一个宿主细胞中可存在多个拷贝...
定义:细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。 应用:在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。 简介:转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。
化学转染：通过使用一些化学物质，如聚乙烯亚胺（PEI）、脂质体等，来改变细胞膜的物理和化学性质，使其对外源性DNA或RNA具有亲和力，从而实现基因转移。2. 化学转染的方法 目前，将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。生物方法主要以病毒作为载体，通过病毒感染的方式将外源 ...