流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。 02 流式检测细胞周期...
流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。操作步骤包括细胞表面标记的检测和细胞内细胞因子的检测。 流式细胞技术是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合...
流式细胞仪大多采用氩离子气体激光器产生激光(波长488nm),在细胞经过测量区的时候,激光垂直照射被荧光染色的细胞,荧光染料被激发从而产生荧光信号和散射光信号。散射光信号分为前向角散射(FSC)和侧向角散射(SSC),FSC反映细胞的大小而SSC反映细胞内部的结构和颗粒性质,细胞内结构越复杂,SSC越强,如下图所示:死细胞的...
实验原理 流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术，它是集激光技术、 光电测量技术、 计算机技术、 流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技 细胞分析技术。 流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。它使细胞或微粒在液流中流动，逐个通 过...
流式细胞术基本原理 1.前向散射与侧向散射 前向散射光 (forward scatter):FSC信号的强弱与细胞的大小相关; 侧向散射光(side scatter):SSC信号的强弱与细胞内的颗粒多少相关。 利用前向角和侧向角散射光可以把外周血白细胞分成三群,淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。
视频二:流式实验技术及常见问题解析。从实验设计的角度展开,穿插入多年的经验总结小技巧,无论是实验新手用来打基础,还是实验老司机用来梳理思路都非常合适。 一 流式基础介绍 01 原理 流式细胞术(Flow Cytometry, FC)利用流式细胞仪可以快速定量分析细胞群(或微粒)的物理化学特征,以及根据这些物理化学特征进行精确分选...
流式实验中对照设置很重要,常见的有阴性对照、FMO对照、补偿单阳管对照。 1 阴性对照 每一种细胞都会产生非特异性荧光,流式检测时得到的荧光信号是细胞本身的非特异性荧光和来自于细胞表面结合的荧光素的特异性荧光叠加得到的结果。所以,确定与荧光素无关的细胞自身的非特异性...
三、流式细胞仪组成和工作原理 液流系统: 单细胞在流动池经过激光检测,样本进入废液——气泡会影响,因此上样一定避免气泡 光学系统: 细胞上结合荧光染料,经过激光激发,产生光学参数。分别为散射光信号和荧光信号 散射光信号: 检测细胞相对大小,而不是具体大小 ...
（1）将冻存管内细胞转移至流式管内，用PBS洗涤两次。（2）用1×binding buffer重悬细胞，至细胞浓度为2×105/ml。（3）加入5ul Annexin V-APC染料和5ul PI染料。（4）4℃避光孵育15min。（5）上机进行流式检测。4.实验结果示例：三、细胞因子检测 1.实验原理 不同的细胞可合成不同的细胞因子，首先使用...