以下是通常的流式细胞分选的步骤: 1.细胞准备:将待分选的细胞进行培养和增殖,直到细胞数量足够用于分选。此外,细胞也可以来源于个体的组织或血液。细胞样本应该处于单细胞悬浮状态,以确保每个细胞的分选准确性。 2.细胞标记:利用适当的荧光标记物标记细胞表面的特定分子或细胞内的组分。常用的标记物包括荧光染料和荧光...
将待分选的细胞制备成单细胞悬液,调整细胞浓度和状态,使其适合流式细胞仪分析。 若需要,使用荧光标记的抗体或染料对细胞进行特异性标记。 仪器校准: 启动流式细胞仪,进行液流稳定性校准,确保细胞能够均匀、稳定地通过检测区域。 用标准荧光微球校准仪器的光学系统和检测通道,确保检测的准确性和重复性。 设定分选参数...
1、分选前应先做预实验,优化流式细胞仪的测定条件,建立分选门,具体操作步骤见 Cellquest操作步骤说明。根据目标细胞的含量,调整流速和样品浓度,使目标细胞通过样品室的浓度为100-300个/秒,最好在200左右。 2、进入CellQuest,从Aquire菜单连机。 3、打开CellQuest中存储的获取窗口,打开优化后存储的仪器设置条件。 4、...
流式分选基本步骤 将样品制备成单细胞悬液,尽量减少死细胞、细胞碎片和小颗粒性物质的比例 荧光素偶联抗体标记样品细胞,4℃静置30min。标记样品细胞的同时可以开始调节流式细胞仪 开启空气压缩机和负压泵,开启液流系统,然后“打点”可见液流 开启激光器,调节激光光路,使得激光正好穿过可见液流的正中央,保证最为理想...
流式分选细胞培养步骤流式分选细胞培养步骤 1.准备:消毒台面;穿戴工作服,帽子,口罩和手套,放置棉签,草纸和有盖垃圾桶(内装有消毒剂); 2.写编号纸并编号; 3.取出PMA(1∶100),BFA(1∶10)和离子霉素(1∶10),使用无菌无叠氮钠PBS稀释储存液; 4.刺激:取全血或PBMCs(细胞数在0.5-1 106)50l/管,再加入50l ...
具体的步骤都是很繁琐的,而且每个实验都不尽相同。只能告诉你这些原则:第一步就是设计,你的分选标记是什么,如果是表面抗体标记,标记后会不会诱导细胞激活,会不会影响下游的实验,这些都要弄明白。第二步,选择你所要用仪器兼容的荧光素。比如你们实验室的仪器没有紫外激光,可是你选用了只有紫外荧光才能激发的荧光素...
1、分选前应先做预实验,优化流式细胞仪的测定条件,建立分选门,具体操作步骤见Cellquest操作步骤说明。根据目标细胞的含量,调整流速和样品浓度,使目标细胞 通过样品室的浓度为100-300个/秒,最好在200左右。 2、进入CellQuest,从Aquire菜单连机。 3、打开CellQuest中存储的获取窗口,打开优化后存储的仪器设置条件。 4、...
1、分选前应先做预实验,优化流式细胞仪的测定条件,建立分选门,具体操作步骤见Cellquest操作步骤说明。根据目标细胞的含量,调整流速和样品浓度,使目标细胞通过样品室的浓度为100-300个/秒,最好在200左右。 2、进入CellQuest,从Aquire菜单连机。 3、打开CellQuest中存储的获取窗口,打开优化后存储的仪器设置条件。 4、...
1、分选前应先做预实验,优化流式细胞仪的测定条件,建立分选门,具体操作步骤见Cellquest操作步骤说明。根据目标细胞的含量,调整流速和样品浓度,使目标细胞通过样品室的浓度为100-300个/秒,最好在200左右。 2、进入CellQuest,从Aquire菜单连机。 3、打开CellQuest中存储的获取窗口,打开优化后存储的仪器设置条件。 4、...
精选优质文档倾情为你奉上细胞分选的简要操作步骤一上样前的准备FACSCalibur可以分选细胞进行培养或功能性研究,而这些研究需要清洁环境以保持分选后细胞不受污染继续培养,因此在样本制备,上机检测分选等过程中需严格按无菌