A:将不含细胞的待测溶液孔中加入 10 μL CCK-8 溶液,孵育 1-4 h 后,测定在 450 nm 处的空白吸光度。若测得的吸光度很小,则说明含有较少的还原剂,正式实验可以直接加入 CCK-8 进行检测;若测得的吸光度相对较大,则说明存在较多还原剂,正式实验时需去除培养基,将细胞洗涤两次后,再加入新的培养基和 10...
3、实验组(红色):培养基+细胞+待测样品; 4、白色孔加入100ulPBS或培养基,以缓解蒸发。 空白孔(不含细胞和待测物质的培养基,含有CCK-8) 对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8,不含有待测物质) 实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 计算公式: 细胞存活率=[(实验孔-空白孔)/(对照孔-空白孔)]x 100...
一、实验应用 1. 细胞增殖测定 2. 细胞毒性测定 3. 细胞活性测定 (不加样本,没有下述DAY 2步骤2) 4. 药物筛选 5. 肿瘤药敏试验 6. 微生物对细胞毒性或增殖的测定 二、实验原理 CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂,可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有水溶性的四唑盐WST-8[...
细胞贴壁后，吸除上清液，然后加入100μL培养基稀释的药物，药物浓度需根据实验要求进行配置。依据实验需求，合理安排药物处理的时间。可直接向每孔中加入10μL CCK-8试剂进行检测。或者，可以预先配制CCK-8稀释液（1mL原液加9ml培养基），将96孔板中的药物培养上清液吸出并保存到新的96孔板中，于20℃冷冻保存，用...
实验步骤: 1. 种板数:根据你摸索的,或者查阅文献确定你需要的种板浓度。对于细胞增殖实验,每孔加入约1000-2000个细胞100ul;对于细胞毒性实验,每孔加入约5000～10000个细胞100ul。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小和增殖速度来决定。 2. 种板:以96孔板为例,96孔板横向是1-12的数字,纵向是A-H,可做...
🔬 CCK-8细胞毒性实验是生物学研究中常用的方法,用于评估药物或其他因素对细胞活力的影响。以下是实验的详细步骤和原理:1️⃣ 细胞准备:首先,将生长状态良好的细胞进行消化、离心和计数,确保细胞的活力。2️⃣ 铺板:将调整好浓度的细胞悬液均匀铺到96孔板中,每孔约3-5千个细胞,并设置4-6个重复孔。3...
🌟 实验器材准备:酶标仪(带450nm滤光片)、移液枪、培养基、CCK-8溶液、二氧化碳培养箱等。🌟 实验步骤: 1⃣️ 制备细胞悬液并进行细胞计数,根据合适的铺板细胞数接种到96孔板中,每孔约100ul细胞悬液。 2⃣️ 向培养板各孔中加入不同浓度的毒性物质,将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)法是一种常用的细胞增殖和毒性检测方法，其实验步骤可以归纳为以下几点：一、实验准备 细胞准备：选择生长状态良好的细胞，进行常规胰酶消化后，离心收集细胞沉淀，并用含血清培养基重悬，制成单细胞悬液。细胞数量根据实验需求调整，对于细胞增殖实验，每孔可加入2×10³个细胞;对于细胞...
CCK-8法细胞毒性检测步骤: 1、首次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK8试剂后的培养时间; 2、接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下; 3、悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色。对于悬浮细胞在加入CCK-8培养1-4小时后,可先从...
(1)增殖:8h或24h(细胞贴壁时间),之后每隔24小时检测下一天的细胞量(MTS 每孔加20μl,CCK8加10μl) (2)毒性和药物:培养24h后加入药物培养48小时及以上 3、增殖实验每天测量一次,以100全培养基:20MTS比例配制总管(CCK8以100:10) 4、吸掉96孔板内待测孔内培养基,每孔加入120μl稀释后的MTS试剂(CCK8加入...