1.细胞毒性 将各组吸光度值输入Excel并计算相对活力(相对活力%=(实验组OD值-背景OD值)/(对照组OD值均值-背景OD值)×100),其中背景OD值为只加CCK8/MTT试剂和培养基的吸光度。将相对活力数值输入GraphPad Prism作图,结果如下: 2.细胞死活染色 荧光显微镜,共聚焦可任选其一进行拍摄,一般提供5-6个视野,可选择不同倍...
细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。细胞毒性(cytotoxic)是由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件,不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。细胞增殖和毒性检测已经成为生物材料必须进行的基础表征,...
1. 细胞周期检测:通过流式细胞术检测PI(碘化丙啶)荧光强度直接反映细胞各时相的DNA分布状态,从而计算出各时相的百分率,以检测外界干预手段对细胞生长周期的影响。2. 细胞凋亡检测:如Annexin V-FITC双染法,通过检测处于凋亡状态的细胞数量来检验目的基因与细胞凋亡的关联或药物对细胞凋亡的影响。综上所述,细胞...
其炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够替代胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine)插入正在复制的DNA分子中, EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如Azide Alexa Fluor 488等)通过一价铜离子催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),从而可以...
4.3种细胞增殖检测方法的比较 二、细胞毒性检测 1.Calcein-AM/CellTracker Deep Red活细胞染料双标流式法 用培养基将细胞调整为1×106个/mL,分别加入Calcein-AM 至终浓度2μmol/L、CellTracker Deep Red Dye至终浓度0.1 μmol/L,37℃避光孵育30 min后,PBS清洗2遍后用培养基将细胞密度调整为2×105个/mL,加入...
1 细胞增殖与毒性检测(CCK8 法)一、实验目的 通过检测细胞活力来验证目的基因对细胞增殖的影响,或验证某种药物对细胞的毒性。二、实验原理 Cell Counting Kit-8(简称 CCK8) 试剂中含有 WST-8。活细胞特别是增殖期细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能够使 WST-8 还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)...
以下介绍几种常见的细胞增殖及毒性检测实验方法:一、MTT实验(噻唑蓝比色法)1. 原理:MTT实验是一种检测细胞增殖的方法;MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)可被活细胞内的线粒体酶还原成紫色结晶物甲簪,而死细胞无此功能;通过溶解结晶物,可测定吸光度,从而反映细胞增殖情况。2. 方法...
最常见的细胞增殖和毒性的检测方法有以下几种:图1.细胞增殖/毒性检测的常见方法 01 细胞代谢检测原理解读 MTT检测法MTT是一种黄色染料,已经普遍用于细胞增殖与毒性检测。检测的原理在于:MTT是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为...
细胞增殖 / 毒性检测试剂盒(CCK-8 法)是一种常用的检测细胞增殖、细胞毒性和细胞活性的方法,以下是该实验的一些注意事项:细胞培养与接种 细胞状态:确保使用处于对数生长期、生长状态良好的细胞进行实验。细胞应形态正常、贴壁良好(针对贴壁细胞)、无明显杂质和污染。对于复苏后的细胞,建议传代 2-3 次后再用于...
细胞增殖是活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征,是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。细胞增殖是指细胞在周期调控的因子下,通过DNA复制等反应,完成细胞分裂的过程。增殖检测一般是分析分裂中的细胞数量的变化,进而反应细胞的生长状态及活性,细胞增殖检测主要分为四类:DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增...