细胞单克隆源性通常指所有细胞都来自同一母细胞,具有相同的遗传信息和表型特征。在细胞生物学和生物工程领域,细胞单克隆性是非常重要的,因为它确保了实验结果的一致性和可重复性。 在实验室中,通过单克隆培养技术或其他方法,可以获得单克隆性细胞系,这些细胞系可以...
1.传代后24~72小时,观察细胞状态良好或处于对数生长期时,每毫升培养物加秋水仙素4～8μL,终浓度为0.4-0.8 μg/mL,继续培养2~6 h,中断纺锤丝形成,从而使细胞停留在分裂中期。【秋水仙素的处理时间不要少于4小时,也不要超过6小时,秋水仙素作用时间越长,被阻止的中期细胞越多,但染色体也会收缩,收缩过度会影...
根据下游应用的不同,单克隆细胞株可以分为两类:用于研究的研究型单克隆细胞株以及用于蛋白/抗体大量生产的生产型高表达单克隆细胞株。 研究型单克隆细胞株筛选 研究型稳定细胞株通常利用G418系统进行阳性克隆筛选,neo基因为非扩增基因,它対基因的拷贝数没有影响,利用G418对细胞池进行筛选可得到稳定转染的阳性克隆,对得到...
一、材料:单克隆细胞 二、试剂: 1. 秋水仙素:称取秋水仙素 1 mg溶于10 mL生理盐水,即配成100 μg/mL,过滤后用0.5mL EP管分装备用,1 mL培养物中加入4μL或 8μL,使最终浓度为 0.4 μg/mL或 0.8 μg/mL。【因秋水仙素具有一定的毒性和致癌作用,故配制使用时做好防护措施,配置后一定要避光保存,...
近期,中国科学院广州健康院张骁研究员团队提出一种基于结构微流体创新的谱系细胞单克隆自动化获取策略,以无标记、无酶活反应参与、非侵入式的方式,在体细胞重编程过程出现的复杂谱系中实现了对特定谱系的单克隆性细胞的自动化获取,并研发出...
下面我们介绍一些单克隆细胞筛选和获得方法：• 有限稀释法：这是一种传统的单克隆筛选方法。首先，将细胞悬液稀释到每毫升几个或几十个细胞的程度，然后将稀释后的细胞分配到96孔板或384孔板中。理论上，如果稀释得足够，每个孔中只有一个细胞。然后，将孔板放入细胞培养箱中进行培养，每个孔中的细胞会逐渐生长和...
病情分析:病情诊断:单克隆细胞在医学检查中通常与某些血液系统疾病相关,特别是与单克隆B淋巴细胞增殖性疾病如慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤等有一定联系。但仅凭“单克隆细胞”这一描述,无法直接确诊具体疾病,需结合其他临床信息、实验室检查结果及影像学检查综合判断。 病因分析:单克隆细胞的出现往往意味着体内某一...
目前，常用的细胞单克隆方法主要是以下三种：有限稀释法，流式细胞荧光分选技术，高通量设备自动化筛选。一、有限稀释法（limiting dilution cloning, LDC）这是目前应用比较多的单克隆挑选方法，将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数，计出1mL的细胞数。细胞单克隆采用有限稀释法的优点很明显，操作简单，...
在我们的细胞学实验中,往往会遇到需要在一群细胞中挑选出特定类型的细胞克隆单独培养扩增的情况。比如,我们在筛选抗药性细胞时,在一段时间药物诱导后,有一部分细胞对药物产生抗性,获得耐药性存活下来,但是活下来的细胞中,耐药性有强有弱,为了得到背景更一致的耐药株,我们需要将细胞单克隆化,比较筛选出满足要求的细胞...