细胞带绿色荧光（如：GFP）可以根据流式细胞仪的配置来选择合适的试剂盒：·流式细胞仪有DAPI通道，选择Annexin V-APC/DAPI(E-CK-A258）试剂盒；·流式细胞仪没有DAPI通道，选择Annexin V-APC/7-AAD(E-CK-A218)试剂盒。细胞带红色荧光（如mcherry/RFP）可以选择Annexin V-APC/DAPI(E-CK-A258)试剂盒。c...
一、Annexin V/PI双染法Annexin V/PI双染法是基于生物学功能检测细胞凋亡的方法，即检测细胞膜完整性，可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测，目前流式是最常用的细胞凋亡检测方法之一。原理：Annexin V可与磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合，因此，可以作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。但Annexin...
进行定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。 二、区分凋亡和坏死 可将二者区分开的方法:琼脂糖凝胶电泳,形态学观察(透射电镜是是区分凋亡和坏死最可靠的方法),Hoechst33342/PI双染色法流式细胞仪检测,AnnexinV/PI双染色法流式细胞仪检测等。 不能将二者区分开的方法...
当细胞发生凋亡时,膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻到膜表面,而与荧光染料FITC标记的Annexin V结合,可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,而4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(4,6-Diamidino-2-Phenylindole,DAPI)可与双链DNA特异性结合并产生强烈的荧光,与Annexin V搭配使用,可区...
在实验中,常用的细胞凋亡检测方法包括使用荧光染料如annexin V-FITC/PI、DAPI等,荧光显微镜观察等。这些方法的原理基于不同的生物学特性,如细胞凋亡引起的胞膜磷脂移位、核酸的变化以及细胞内酶的释放等。这些生物学特性可以作为检测细胞凋亡的标志。了解细胞凋亡的特征、实验原理和过程对于深入理解细胞凋亡机制、诊断疾病...
1小时内进行流式细胞仪机检测。GFP的绿色荧光:FITC通道筛选GFP阳性细胞进行Annexin V-APC/7-AAD荧光检测。Annexin V-APC的红色荧光:激发波长633nm,最大发射波长660 nm。7-AAD红色荧光:激发波长Ex=546 nm;发射波长Em=647 nm。 2 DAPI染色 培养的单层细胞 (未固定)...
① Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡 细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液 用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。
将 Annexin-V 进行荧光素(FITC、PE)或 biotin 标记,以标记了的 Annexin-V 作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶 (propidine iodide,PI) 是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将 Annexin-V 与 ...
2)Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测 3)细胞核染色-荧光染色法(Hoechst/DAPI) 4)DNA片段原位检测(Tunel) 5)膜变化检测(AnnexinV染色、膜电位、线粒体功能完整性分析检测) 6)分子水平检测:检测与凋亡相关的分子标志物 1)电子显微镜观察 胞浆浓缩,核糖体聚集在核膜周边呈新月状或环状小体。
DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。 碘化丙啶(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。 注意事项:细胞凋亡时,其DNA可染性降低被认为是凋亡细胞的标志之一,但...