1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液;2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来;4. 离心1000rpm,5min;5. 去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液;6. 将细胞分装入冻存管中。 注:冻存:标准的冻存程序为降温速率-1～-...
细胞冻存液的配方会因具体实验需求有所不同,但一般都包含保护剂和渗透压调节剂。比如,保护剂通常选用二甲基亚砜(DMSO)或甘油,加入无菌水中,浓度为5%-10%。同时还需要添加如聚乙二醇(PEG)这样的渗透压调节剂,以维持细胞内外的渗透平衡。另外,也有配方使用90%FBS+10%DMSO,或者20%FBS+70%培液+10%DMSO的组合。还...
1.从液氮容器中取下冻存管,立即渗入37℃温开水中,并时常摇晃令其尽早溶化。 2.从37℃水浴中取下冻存管,开启外盖,用塑料吸管吸出来体细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上细胞培养液,搅拌; 3.抽滤,1000rpm,5min; 4.弃去上清液,添加含10%小牛血清细胞培养液重悬体细胞,记数,调节体细胞相对密度,打疫苗塑造瓶...
细胞冻存液的配置方法: 70%DMEM(高糖培养基) 20%胎牛血清 10%DMSO(二甲基亚砜) 🧪操作步骤: 去旧培养基:先用PBS清洗100mm培养皿3次,每次1ml,沿壁加入,不要直接冲洗细胞,可浸泡30s。 加入胰酶:去除PBS后,向100mm培养皿中加入1ml胰酶,6孔板中加入500ul,用十字摇匀法摇匀。 消化细胞:将培养皿放入37℃,5...
1. DMEM冻存液配方 - DMSO：10% - FBS：90% 将DMSO和FBS混合均匀，制备成冻存液后，将细胞与冻存液混合均匀，分装到保存容器中进行冷冻保存。2. RPMI 1640冻存液配方 - DMSO：10% - FBS：50% - RPMI 1640培养基：40% 将DMSO和FBS混合均匀，加入RPMI 1640培养基中，制备成冻存液后，将细胞与冻存液...
冻存液的配制( 4°C冰箱放置,现配现用) DMSO:血清=1:9 DMSO:血清:培养基=1:2:7 (DMSO:降低溶液冰点,并在缓慢冻结条件下,快速进入细胞,使细胞内水分透出,减少冰晶的形成,避免细胞损伤;) 常规内旋冻存管,图片来源于网络,侵删 异丙醇冻存盒,图片来源于网络,侵删 ...
12. 细胞冻存液常用的配方有哪些? 目前,细胞冻存液多采用DMSO(二甲基亚砜)或甘油作为保护剂。常见的配方有:培养基:血清:DMSO = 7:2:1或8:1:1或5:4:1,或者直接使用血清:DMSO = 9:1。高浓度的血清有助于维持细胞的活力,复苏后的存活率通常在80%到90%之间。13. 没有细胞冻存盒怎么办?
目前细胞冻存液多采用的什么配方 12小时前 目前细胞冻存多采用DMSO二甲基亚砜或甘油作保护剂,细胞冻存液的配方有很多种,如培养基:血清:DMSO=7:2:1或8:1:1或5:4:1,或直接用血清:DMSO=9:1,一般高浓度血清有助于维护细胞活力,复苏存活率在80%～90%以上。
配方一: 最经典的一种就是含10%DMSO(二甲基亚砜)和90%胎牛血清的冻存液。DMSO这个东西很神奇哦,它就像是细胞的保护神。在细胞冻存的时候,细胞周围的环境变得超级冷,这个时候细胞里的水就会有变成冰晶的危险,冰晶就像小刀子一样会把细胞给划伤,那细胞就死翘翘啦。但是DMSO可以降低细胞里水结冰的温度,这样就可以...