细胞免疫荧光实验步骤通常包括以下几个步骤: 取出细胞贴附生长的小盖片或晾干的细胞涂片,用预热的PBS冲洗2次。 4%多聚甲醛(或冷丙酮)固定5~10分钟,晾干。 0.01mol/L PBS(pH 7-4)漂洗5分钟×3次。 0.3%TritonX-100,室温,20分钟,PBS漂洗3分钟×2次(细胞膜抗原可省略此步骤)。 非免疫血清孵育,室温,10分钟。
细胞免疫荧光实验步骤 第一步:样本准备 1.根据实验需要,选择并培养适当的细胞系或组织样本。 2.将细胞或组织培养在适当的载玻片、孔板或离心管中。 3.使细胞或组织粘附在载玻片等表面上。 第二步:固定和渗透化处理 1.使用适当的缓冲液(如甲醛)或有机溶剂(如甲醇)将细胞/组织进行固定处理。 2.在室温或低温...
一、准备细胞样本在进行免疫荧光实验前,需要准备所需的细胞样本。可以使用常规的细胞培养技术,将细胞种植在适合的基质上生长,如盖玻片、载玻片或微孔板等。确保细胞贴壁生长,以便后续的操作。二、细胞固定固定细胞是免疫荧光实验中的关键步骤之一,可以有效地将细胞内的蛋白质固定在细胞内,使其不再移动。常用的固定...
1)取对数生长期细胞进行消化计数,提前使用24孔爬片置于12孔板内,调整细胞数量为1×103/ml,在12孔板中接种滴/孔。每个组重复孔3个(最好4个,一定要有副孔思维)。接种过程要反复多次混匀。 2)24h进行相应处理,小干扰转染、质粒转染、加药等。 3)处理完毕以后,将12孔板带出细胞间。 4)用逸漠生物的PBS洗三遍,...
步骤一:样本制备 在进行免疫荧光实验之前,首先需要准备好实验样本。通常情况下,样本可以是细胞培养物、组织切片或裂解后的细胞提取物。对于不同类型的样本,制备方法会有所差异,需要根据具体情况进行处理。步骤二:固定样本 固定样本是免疫荧光实验的关键步骤之一,主要目的是使样本中的蛋白质保持原有的结构和位置,...
IF实验流程概览及关键点 图4:免疫荧光步骤包括细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等 ➤IF操作步骤 样本前处理-细胞样本 1.洗涤:弃去培养基,在细胞上缓慢加入常温TBS,清洗2次,每次5秒;2.固定:在细胞上覆盖 4%中性甲醛固定液(TBS缓冲液配制),置于4℃,固定15min;固定液需足量;3.洗涤:去除固定...
三种细胞免疫荧光染色操作步骤(二)。三、细胞免疫荧光简单实验步骤如下: 1. 漂洗血清蛋白H7、2-7、4 37度 PBS 2小时。 2. -20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟。 3. PBS洗净:3min×3。 4. 1%Tr - 实验小鼠鼠于20240326发布在抖音,已经收获了1个喜欢,来抖音,记录
细胞免疫荧光主要应用于细胞内抗原抗体检测,适用于细胞水平实验。那么细胞免疫荧光有哪些方法和步骤呢?让我们一起来看看吧! 一、直接法 将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检。
一、实验方法原理 在进行细胞免疫荧光过程中,需要用到细胞爬片,通过将爬片浸在细胞培养基内,细胞在爬片上生长,进而进行细胞的免疫荧光。 二、实验材料 1.细胞样品 2.试剂、试剂盒:多聚甲醛 70%甲醇 丙酮 PBS Triton BSA DAPI染液 DABCO Tris 甘油 3.仪器、耗材:玻片 ...
细胞爬片免疫荧光实验操作步骤1. 细胞培养:• 在超净工作台内,将灭菌盖玻片放置于六孔板中。• 将细胞悬液滴加至盖玻片上,然后置于CO2浓度为5%的培养箱中,于37℃培养至细胞固着(约2小时)。• 加入2mL细胞培养液,继续培养约6小时。• 倒去培养基,用PBS洗涤3次,每次5分钟。2. 细胞固定:• 使用4%多...