获取用于流式细胞分析的JC-1染色方案 成像方案包括不同细胞类型的JC-1染色条件,例如粘附细胞和游离细胞。 获取用于成像的JC-1染色方案 JC-1染料的替代品 虽然JC-1染料被广泛使用,但在流式细胞术中有适合不同滤...
JC-1 是一种可渗透膜的阳离子染料,用于研究细胞凋亡背景下的线粒体完整性。 jc-1结构式 它选择性地进入线粒体并随着线粒体跨膜电位 (ΔΨm) 的改变而改变荧光特性。 在具有高线粒体 ΔΨm 的健康细胞中,JC-1 形成称为 J-聚集体的复合物,其发出红色/橙色荧光,并且可以通过流式细胞术使用 FL2 设置进...
jc-1线粒体膜电位染色实验原理 线粒体膜电位染色实验是一种测定线粒体膜电位的方法。线粒体膜电位是指线粒体内外膜之间的电位差,是维持线粒体功能的重要参数之一。线粒体膜电位的高低与线粒体的能量代谢、ATP合成、离子通道的开闭等过程密切相关。因此,测定线粒体膜电位对于研究线粒体的生物学功能具有重要意义...
检测原理JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在形式,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1以多聚体形式存在于线粒体的基质中,产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1以单体形式存在于...
JC-1是一种荧光亲脂性羰花青染料,用于测量线粒体膜电位。 线粒体膜电位较高时, JC-1 在基质中汇聚形成聚合物 (J-aggregates),可以产生红色荧光 (Ex/Em=585/590 nm);线粒体膜电位较低时,JC-1 不能聚集在线粒体基质中,以单体形式存在产生绿色荧光 (Ex/Em=510/527 nm)。这样就可以非常方便地通过荧光...
JC-1染色原理JC-1在通过流式细胞术检测线粒体膜电位中广泛使用。JC-1能够选择性的进入线粒体中,并且由于膜电位的增加(大约超过80-100 mV)其颜色会发生从绿色到橙色的可逆变化。这种特性是由于JC-1聚合物的可逆结构,在膜极化条件下,它的发射光由530nm(J-单体发射光)转移到590nm (JC-1聚合体发射光)。当在...
JC-1染色:取一定体积的细胞悬液,加入JC-1工作液,在适宜的温度和二氧化碳环境下孵育一段时间。 洗涤:离心细胞悬液,去除上清,然后用缓冲液洗涤以去除未结合的染料。 荧光检测:用荧光显微镜或流式细胞仪分析经JC-1染色后的细胞,通过观察红绿荧光的比例变化来判断线粒体膜电位的状态。
1.细胞染色 1.1悬浮细胞 (1)细胞铺板:以6孔板为例,每孔用1mL培养基重悬100万细胞,其他培养器皿以此类推,也可根据自己的细胞类型选择合适的密度进行铺板。 (2)设置阳性对照:取适量CCCP处理细胞,细胞培养箱37℃孵育5min。 (3)JC-1染色:加入适量JC-1,细胞培养箱37℃孵育15min。一般情况,15min足以进行充分的染...
进行JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法):首先,选择合适的化合物进行凋亡诱导,细胞密度不超过1×106cells/mL。其次,取细胞悬液至无菌离心管,室温400 x g离心5 min,吸去上清,用JC-1工作液重悬细胞,于37℃,5%CO2培养箱孵育15-30 min。之后,室温离心,吸去上清,用培养液或...
染色原理: JC-1的魔术般转变 当细胞保持活力,线粒体的跨膜电位(ΔΨm)处于高位时,JC-1会形成稳定的J-聚集体,发射出温暖的红橙色荧光,FL2通道将成为你的探测器。然而,当ΔΨm下降,标志着凋亡的预警信号,JC-1解聚成单体,瞬间换上了鲜明的绿色荧光,FL1通道(FITC)则揭示了这一微妙变化...