获取用于成像的JC-1染色方案 JC-1染料的替代品 虽然JC-1染料被广泛使用,但在流式细胞术中有适合不同滤光片的替代试剂,有使用单发射、非比率试剂来研究动态变化的方案,还有使用终点检测来评估线粒体膜电位的方案。...
JC-1线粒体膜电位荧光探针染色步骤(流式细胞仪法): 1. 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/mL。37℃,5% CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。 2. 取0.5 mL...
（5）用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤2次：加入1mL JC-1染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入1mL JC-1染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4分钟， 沉淀细胞，弃上清。（6）再用适量JC-1染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察...
JC-1是一种荧光亲脂性羰花青染料,用于测量线粒体膜电位。 线粒体膜电位较高时, JC-1 在基质中汇聚形成聚合物 (J-aggregates),可以产生红色荧光 (Ex/Em=585/590 nm);线粒体膜电位较低时,JC-1 不能聚集在线粒体基质中,以单体形式存在产生绿色荧光 (Ex/Em=510/527 nm)。这样就可以非常方便地通过荧光...
JC-1线粒体膜电位荧光探针染色原理 JC-1 是一种可渗透膜的阳离子染料,用于研究细胞凋亡背景下的线粒体完整性。 jc-1结构式 它选择性地进入线粒体并随着线粒体跨膜电位 (ΔΨm) 的改变而改变荧光特性。 在具有高线粒体 ΔΨm 的健康细胞中,JC-1 形成称为 J-聚集体的复合物,其发出红色/橙色荧光,并且...
Q4贴壁细胞能否直接用JC-1在6孔板染色后，再用胰酶消化下来上流式？不建议，贴壁细胞之间相互接触可能会导致细胞与染料接触不均一，对JC-1染料进入细胞造成影响，尤其是当细胞生长较为密集的时候。推荐消化细胞后再孵育JC-1。Q5石蜡切片和冰冻切片可以做JC-1吗？不可以，JC-1实验的样本必须是活细胞。Q6JC-1孵育...
1、收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。细胞数量在2-5X105个。 2、用PBS洗涤细胞两次。离心收集细胞。 3、用500ul JC-1染色工作液将细胞重悬,37℃,5%CO2的培养箱中孵育15-30分钟。 4、在4°C,300-500×g力离心间5分钟,弃培养基,收集细胞。
在进行JC-1线粒体膜电位流式分析时,一般的步骤如下: 1.染色:将细胞用JC-1染色,允许染料进入细胞内并与线粒体结合。 2.洗涤:洗涤细胞,以去除多余的染料。 3.流式细胞仪分析:使用流式细胞仪对染色后的细胞进行分析。通过设置适当的激光和检测器,可以同时获得JC-1的红色和绿色荧光信号。 4.数据分析:通过流式...
线粒体膜电位检测(JC-1) 大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(△的破坏,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。JC-1(5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3...
数据分析:含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测;含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1(FITC)通道检测。 3. JC-1染色步骤(荧光显微镜) A. 悬浮细胞 1)-6)同上JC-1染色步骤(流式细胞仪); 7)用0.3 mL的缓冲液重悬细胞,即可进行荧光显微镜检测。注意:请马上进行荧光显微分析,此细节重要。