加入RIPA裂解缓冲液裂解各组海马神经元提取蛋白,BCA法检测各组蛋白浓度,调整上样体积至每个泳道蛋白量相等;12% SDS-PAGE凝胶电泳(上层胶80 V 30 min,下层胶120 V 90 min),电泳结束后将胶上的蛋白质条带转移至PVDF膜上;5%脱脂奶粉封闭2 h;一抗β-actin(1∶3000)、CHOP(1∶500)、HSP60(1∶1000)、ClpP(1...
目的 探讨线粒体未折叠蛋白反应在无镁外液致痫海马神经元中的变化及线粒体自噬抑制剂Mdivi-1对其影响.方法 原代培养海马神经元用无镁外液诱导体外癫痫模型,并进一步采用线粒体自噬抑制剂Mdivi-1干预;采用线粒体荧光探针MitoSOX检测线粒体ROS生成、Rhodamine 123检测线粒体膜电位、采用Western... 查看全部>> ...