原理: 免疫分选法使用针对线粒体膜表面特异性抗原的抗体,通过磁珠或柱层析等方式分离纯化线粒体。 步骤: 抗体标记:线粒体粗提物中的线粒体膜表面抗原与特异性抗体结合。 磁珠/柱分离:使用与抗体结合的磁珠进行磁性分选,或使用抗体结合柱分离线粒体。 洗脱与纯化:去除非特异性结合的成分,最终得到高度纯化的线粒体...
加入0.25mol/L蔗糖与0.003 mol/L氯化钙液l ml,用吸管吹打成悬液,以17000 rpm离心20 min,将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1ml 0.25mol/L蔗糖与0.003mol/L氯化钙溶液混匀成悬液.即得线粒体。 简单的鉴定人线粒体的方法: 1、形态法辨别取 你用试剂盒提取最后一步的上清液和沉淀物悬液,分别滴一滴...
线粒体的提取及纯化 Mitochondriaisolation 1.将一定鲜重（FW）的黄化苗剪成2~3cm的小段，倒入5ml/gFW的缓冲液A，然后在冰水浴（以下未加说明，操作温度均为0~4℃）中进行研磨。研磨液用8层纱布过滤，滤液经4000rpm离心15min。1.Harvest10gdark-grownetiolatedseedlings,coolthemto0℃.Conductthesubsequentoperationso...
几种不同提取线粒体的方法对线粒体含量及活性的影响
细胞线粒体提取：1.取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；2.用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。3.加入400μl冷的试剂A，置冰上10分钟。4.用Dounce匀浆器匀浆30-40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。5.快速将上清吸入另一预冷的干净...
线粒体的提取及纯化 Mitochondriaisolation 1.将一定鲜重（FW）的黄化苗剪成2~3cm的小段，倒入5ml/gFW的缓冲液A，然后在冰水浴（以下未加说明，操作温度均为0~4℃）中进行研磨。研磨液用8层纱布过滤，滤液经4000rpm离心15min。1.Harvest10gdark-grownetiolatedseedlings,coolthemto0℃.Conductthesubsequentoperationso...
因此对提取线粒体DNA的质量要求也高了,本文通过对近几年文章中所涉及到的一些常见的提取方法,比如氯化铯密度梯度离心法、Triton法、柱层析法、改良碱变性法以及改良高盐法等进行分析比对,筛选出获得高质量线粒体DNA的方法。 关键词:线粒体;线粒体DNA;提取方法...
2024年9月26日,南开大学的李艳君副教授团队在《Mitochondrial Communications》期刊上发表了一项重磅研究,提出了一种新的线粒体分离方法,不仅可以提取高纯度的线粒体,还能有效分离异质性线粒体,这一进展将对生物医学研究产生深远影响。 首先,该研究团队开发的第一种方法利用了TOMM20抗体偶联的磁珠来实现线粒体的高...
提取线粒体可不只是在实验室里玩玩哦,这可是有大用处的呢!咱可以通过研究线粒体,了解细胞是怎么工作的,就像了解一个机器的内部构造一样。这对很多疾病的研究和治疗都很重要呢! 比如说,有些疾病可能就是线粒体出了问题。那咱要是能把线粒体研究透了,不就能更好地找到治疗的办法了嘛! 所以啊,提取线粒体虽然...
01线粒体DNA提取方法酚-氯仿提取法经典提取方法酚-氯仿提取法是一种常用的线粒体DNA提取方法,利用酚和氯仿混合物对细胞进行裂解,释放出线粒体DNA。该方法操作简便,但提取过程中可能会损失线粒体DNA。试剂盒提取法高效提取方法试剂盒提取法是一种高效、简便的线粒体DNA提取方法,利用专用的试剂盒进行操作。该方法...