二、线粒体功能检测方法：1. 形态学观察：通过透射电子显微镜(TEM)可以直接观察线粒体的形态结构，包括线粒体的大小、形状、嵴的结构等。此外，还可以使用荧光染料(如Mitotracker)对线粒体进行染色，然后通过荧光显微镜观察线粒体的形态和分布。2. ROS水平检测：活性氧(ROS)是线粒体功能异常的重要指标之一。可以...
钙黄绿素-AM是一种活体细胞线粒体MPTP荧光检测试剂，通过钙黄绿素-钴技术（聚集在线粒体内的钙黄绿素呈现荧光染色，而存在于胞浆或由线粒体释放到细胞质中的荧光染料即刻发生荧光淬灭）来分析和观察线粒体膜通道孔活性。此外，对线粒体的功能研究还可以从线粒体ATP测定、线粒体呼吸链复合体活性测定、线粒体DNA...
增强细胞焦亡;敲除Crls1和Plscr3后,发现IL-1β的释放也受到抑制,表明线粒体损伤可以增强IL-1β的释放;线粒体损伤促进细胞焦亡诱导体内抗肿瘤免疫;通过荧光原位杂交技术发现,线粒体损伤导致线粒体RNA外切酶PNPT1释放,引起全局mRNA降解,促进细胞焦亡的发生。
线粒体功能的检测方法 1.呼吸链酶活性测定:线粒体内的呼吸链酶是线粒体内呼吸过程的关键酶,通过测定这些酶的活性可以评估线粒体呼吸功能。常用的呼吸链酶活性检测包括葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙酮酸脱氢酶(BDH)等。 2.ATP产生测定:线粒体是细胞内ATP的主要合成器官,通过测定ATP的产生量...
因此,我们可以通过检测活性氧的多少来测定线粒体的功能是否正常。 线粒体膜电位检测 由于线粒体内膜独特的离子通过性,代谢产生的H+使线粒体内膜两侧通常出现负电位差(-180 mV~-200 mV),这就是线粒体膜电位(mitochondrialmembrane potential, MMP, Δψm)。MMP的变化甚至微量变化,都会极大地影响线粒体的功能[...
线粒体mtDNA的检测 🔬 通过PCR或Southern blot等分子生物学方法,可以检测线粒体DNA的突变或缺失。 线粒体呼吸耗氧率的检测 🌬️ 通过海马呼吸实验或相关呼吸测定仪,可以检测线粒体的呼吸功能和耗氧率。 钙离子的检测 💧 钙离子在细胞内的作用非常重要,通过特定的荧光染料或化学方法可以检测细胞内的钙离子水...
以下是几种常用的检测线粒体功能的方法: 1.电子传递系统测定法 电子传递系统是线粒体中的一个复杂的蛋白质体系,负责产生细胞所需的ATP。通过使用各种方法,可以对线粒体的电子传递系统进行测定,以评估线粒体功能的健康状况。这些方法包括测定线粒体中的酶活性、测定氧化还原电位、测定ATP合成速率等。 2.呼吸链酶...
目前,常用的线粒体功能检测方法主要包括生化检测、影像学检测和分子生物学检测。生化检测是最常用的方法之一。生化检测可以通过测定线粒体内各种关键酶的活性来评估线粒体的功能状态。通过测定线粒体呼吸链酶的活性,可以评估线粒体的氧化磷酸化功能是否正常。还可以通过测定线粒体内钙离子的浓度来评估线粒体的钙离子...
线粒体膜电位的变化反映了其功能状态，监测MMP通常使用荧光染料探针结合流式细胞术来实现。MPTP的检测则需要利用钙黄绿素-AM这种活体细胞线粒体MPTP荧光检测试剂，通过钙黄绿素-钴技术来分析和观察线粒体膜通道孔活性。除了上述方法，对线粒体功能的全面评估还应包括线粒体ATP测定、线粒体呼吸链复合体...
线粒体功能概述 生化检测方法 分子生物学检测方法 细胞生物学检测方法 影像学检测方法 实际应用与案例分析 3 01 线粒体功能概述 定义 线粒体是细胞中的一种由两层膜包被的细胞器,是细胞中制造能量的结构,是细胞进行有氧呼吸的主要场所,被称为“powerhouse”。 结构 线粒体由外至内可划分为线粒体外膜、线粒体...