介绍两种常用于测定核酸样品含量的方法,并说明其原理?(1)紫外吸收法:核酸在260nm有紫外吸收峰。在260nm测定光吸收值,如果是双螺旋DNA样品,OD260nm =1,则相当于含有50ug/mLDNA;若是RNA样品或单链DNA,OD260nm =1则相当于40ug/mL,从而可以计算获得核酸样品的含量。 (2)定磷法:核酸中P的含量比较稳定,可以通...
用紫外吸收法测定核酸的含量的原理是核酸、核苷酸及其衍生物能吸收紫外光。RNA和DNA的紫外吸收高峰在( E )纳米波长处。可以用( F )/( G )的比值来判断核酸的纯度,纯净的RNA溶液,该值≥( A );纯净的DNA溶液,该值≥( ) A. 1.8 B. RNA C. DNA D. 260 E. A260 F. A280 相关知识点: ...
紫外吸收法测定核酸含量 实验十六紫外吸收法测定核酸含量 目的要求学习紫外线（UV）吸收法测定核酸浓度的原理。a 1 实验原理 核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统（－C＝C一C＝C一），能够强烈吸收250~280nm波长的紫外光。核酸（DNA，RNA）的最大紫外吸收值在260nm处。在此波长处...
RNA和DNA的紫外吸收峰在260nm波长处,一般1μg/ml RNA溶液在1cm光径比色皿中的光吸收峰值约为0.022,1μg/ml DNA溶液的光吸收值为0.020。因此测定未知浓度RNA或DNA溶液在260nm的光吸收值即可计算出其中核酸的含量。此法操作简便,迅速。若样品内混杂有大量的核苷酸或蛋白质等能吸收紫外光的物质,则测定误差较大,...
pH对核酸紫外吸收性有影响,所以在测定时要固定溶液的pH值。 本实验采用常用的比消光系数法来测定核酸含量。 [方法和步骤] 1、测定 取洁净离心管甲乙两支,分别准确加入1.0mL DNA/RNA样液,然后向甲管加入1.0mL蒸馏水,向乙管加入1.0ml过氯酸-钼酸铵沉淀剂,摇匀后置冰箱内30min,使沉淀完全。3000r/min离心10min,...
紫外吸收法测定核酸的含量 实验名称 紫外吸收法测定核酸的含量（4课时）一、实验目的：学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理，熟悉紫外分光光度计的使用方法。二、实验原理：核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健系统（-C=C-C=C-），能够强烈吸收250-280nm 波长的紫外光。核酸（DNA,...
核酸对紫外光的最大吸收凤位于260nm处,而蛋白质位于280nm处,260nm的吸收仅为核酸的1/10,因此蛋白质含量较底时对实验影响不大;当样品中蛋白质含量较高时,将样品移至试管中,加入一定量稀盐溶液,用玻璃棒小心搅拌,使蛋白质沉淀,滴加少量25%SDS溶液,边加边轻轻搅拌。加毕,在60℃水浴中保温10分钟,并不停轻轻搅...
核酸的含量测定I——紫外吸收法 实验35 核酸的含量测定I——紫外吸收法 一、 目的和要求 1、 学习紫外吸收法测定核酸含量的原理。 2、掌握利用紫外分光光度计测定核酸含量的方法。 二、 实验原理 DNA 和RNA 都有吸收紫外线的性质,最大吸收峰在260nm 波长处。紫外吸收是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的...
实验九实验九紫外吸收法测定核酸的含量紫外吸收法测定核酸的含量一、 实验目的一、 实验目的1 1、 通过实验, 了解紫外线(、 通过实验, 了解紫外线(UV1 1、 通过实验, 了解紫外线(、 通过实验, 了解紫外线(UV核酸浓度的原理。核酸浓度的原理。2 2、 进一步熟悉紫外分光光度计的使用方法。、 进一步熟悉紫外分光...
紫外吸收法测定核酸的含量 一、目的 学习紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法,熟悉紫外分光光度计的基本原 理和使用方法。 二、原理 核酸、核苷酸及其衍生物的分子结构中的嘌呤、嘧啶碱基具有共轭双健 系统(-C=C一C=C一),能够强烈吸收250~280nm波长的紫外光。核酸 (DNA,RNA)的最大紫外吸收值在260nm处...