糖基化蛋白质是一种经过糖基化修饰后的蛋白质，它在细胞的信号传递、免疫识别以及细胞间的相互作用等生物过程中发挥了重要的角色。但是，糖基化修饰的复杂性使得它的分析成为了一项挑战。质谱分析技术，凭借其高灵敏度和高通量的优势，为糖基化蛋白质的检测与分析提供了新的可能。以下，我们将详细介绍如何利用质谱...
这些O糖在细胞中具有特殊功能,包括激素调节、脂质代谢和生长因子、信号转导等[3]。部分研究者对果蝇的多肽α-N乙酰半乳糖胺转移酶基因进行RNA干扰,发现果蝇特定的形态和功能效应受到影响,说明了发育过程中位点特异性O-糖基化的重要性[4]。 随着质谱表征技术的更新换代,...
当然可以!利用质谱(MS)进行糖基化分析,确实可以根据糖型(Glycan)组成来分析单个糖(Monosaccharide)在不同组间的差异.这种分析通常需要配合液相色谱(LC)或者气相色谱(GC)进行,也就是所谓的LC-MS或GC-MS
癌症细胞中N-聚糖的分析结果显示,原位肿瘤MIA PaCa-2细胞分泌的糖蛋白增加,然而含有较多分泌糖蛋白的人类血清在其特定糖基化位点上的聚糖却发生了显著变化。上述结果表明,肿瘤特异性糖基化可作为胰腺癌诊断的潜在生物标志物。此外,本研究发现抗KRAS G12C突变的小分子抑制剂AMG-510可显著降低MIA PaCa-2细胞的糖基化...
1.1富集糖基化肽段 由于糖基化蛋白质丰度非常低,在上质谱分析前,必须有高效的糖基化肽段富集方法。常用的富集方法包括凝集素富集,但是该方法不能富集到所有的糖基化肽段;也有亲水作用液相色谱(HILIC),但由于HILIC依赖亲水性差异,因此亲水性的非糖基化肽段不能与糖基化肽段区分,结果特异性较差。 科研人员利用硼...
一般发生N-糖基化位点修饰的蛋白质,均有基本的氨基酸结构骨架。首先对蛋白质进行酶解,然后用PNGase F糖苷酶切除链接在ASN上的糖链,通过高精度LC-MS/MS检测脱糖后肽段,确认脱糖后分子量与理论分子量的变化以及糖基化修饰肽段的序列,从而确定蛋白质的糖基化位点。 实验仪器 1) Q-Exactive, ThermoFisher Scientifi...
O-糖基化糖谱分析就是对质谱检测形成的质荷比(m/z)图谱进行分析。糖基化修饰是最复杂最常见的蛋白质翻译后修饰方式之一,其鉴定分析也面临着巨大的挑战,高灵敏度高通量的生物质谱技术是目前研究蛋白质糖基化修饰的首选技术手段。糖基化修饰鉴定分析主要包括鉴定糖基化类型、糖基化位点、糖链结构以及定量。O-糖基...
本研究采用液相色谱对样品中的糖肽进行分离富集,MALDITOF/TOFMS和FTICRMS多重质谱检测,对糖蛋白糖链结构及糖基化位点进行同步解析。MALDITOF/TOFMS通过对少量样品的完整糖肽及切除糖链的肽骨架分析,可获得肽骨架序列、糖基化位点及糖链结构的信息,分析速度快。FTICRMS的CAD碎裂模式和ECD碎裂模式相结合,不需要切除糖链...
内容提示: 第42卷第5期质谱学报 Vol .42 No .5 2021年9月 Journal of Chinese Mass Spectrometry Society Sep .2021免疫球蛋白 G 糖基化修饰的质谱分析方法及其应用赖治臻 ,周巾煜 ,李智立(中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院 ,北京 100005)摘要 :IgG 是一种参与体液免疫的关键糖蛋白 ,其...
本应用简报展示了利用毛细管电泳和质谱 (CEMS) 对重组单克隆抗体 (mAb) 糖基化进行分 析。此方法包括利用 N-糖苷酶 F (PNGase F) 酶解 mAb 得到多糖,对多糖进行荧光标记 (8-氨基吡-1,3,6-三磺酸三钠盐,ATPS),并利用 Agilent 7100 CE 串联 Agilent 6520 精 确质量 Q-TOF LC/MS 进行分析。从使用的...