1、将共培养后的类器官和悬浮的T细胞分离:小心用枪头将上清吸弃,留下类器官;加入适量类器官传代缓冲液(abs9730),吹打重悬类器官,待自然沉降后,吸弃掉上清,可以根据实际情况选择清洗次数; 2、类器官的石蜡切片免疫组化,可以参考链接类器官HE染色、免疫组化、免疫荧光鉴定方法,T细胞检测marker根据实验需求来,比如CD31。
3.具有一定的可灌注功能,如:向血管化的类器官中灌注FITC-葡聚糖,通过检测类器官内部的FITC信号,确定血管是否具有可灌注的功能[13]; 4.与未血管化的类器官相比,能够更好地维持类器官的长时间生长,凋亡信号更低[14]; 5.与某些类器官共培养时能够执行功能,如:与脑类器官共培养可以形成血脑屏障; 6.在体内移植...
5）使用培养基（RPMI1640，10%FBS，1%双抗，2mM谷氨酰胺，5ng/mL IL-4与GM-CSF），悬浮调整至合适浓度，96孔板，每孔约加入5*105 活PBMC，100uL体积；6）重悬类器官混合液，分别加入等量的样至96孔板中，至总体积200uL。3、培养观察 1）D0观察记录细胞状态；2）37℃，5%CO2条件下培养，每日连续观察；3...
研究人员通过来自患者的自体肿瘤构建的类器官和外周血淋巴细胞共同培养，建立一个能够特异性诱导分析肿瘤免疫反应的平台，为分离评估肿瘤免疫中T细胞提供了新的方法，文章的三大亮点：（一）说明了肿瘤类器官和免疫细胞共培养可诱导T细胞的特异性免疫反应。（二）诱导的T细胞不会特异性识别正常的类器官或组织。（三）该平...
类器官无血清培养基:提前放于4℃融化; 96孔超低吸附培养板(abs7059) ▲注意:使用无血清体系和超低吸附板均可有效避免类器官贴壁。 2、共培养步骤 (1)使用T细胞无血清完全培养基重悬PBMC,96孔板,5*10^5个PBMC/每孔,100uL细胞悬液/每孔; (2)使用类器官无血清培养基重悬类器官,向含T细胞的96孔板中加入250...
类器官技术是一种体外培养细胞的方法，可以模拟人体器官的结构和功能。在该研究中，研究人员使用原代HCC细胞和人类肝细胞来构建HCC器官模型，然后将GPC3-7-19-CAR-T细胞和其他CAR-T细胞与该模型共同培养，以验证GPC3-7-19-CAR-T细胞的疗效。通过这种方法，研究人员可以更好地模拟GPC3-7-19-CAR-T细胞在人体内的作用...
类器官技术是一种体外培养细胞的方法,可以模拟人体器官的结构和功能。在该研究中,研究人员使用原代HCC细胞和人类肝细胞来构建HCC器官模型,然后将GPC3-7-19-CAR-T细胞和其他CAR-T细胞与该模型共同培养,以验证GPC3-7-19-CAR-T细胞的疗效。通过这种方法,研究人员可以更好地模拟GPC3-7-19-CAR-T细胞在人体内的作用,为...
研究者通过神经诱导，将低代次的多能干细胞（iPSCs）培育成神经祖细胞，形成神经球，再分化为早期脑类器官。随后，将成熟的脑类器官与带有荧光标记的急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞共培养。结果显示，白血病细胞在共培养14天后能深入类器官内部，展示出强大的侵袭能力。研究还发现，白血病细胞的侵袭能力随时间逐渐增强，...
类器官无血清培养基:提前放于4℃融化; 96孔超低吸附培养板(abs7059) ▲注意:使用无血清体系和超低吸附板均可有效避免类器官贴壁。 2、共培养步骤 (1)使用T细胞无血清完全培养基重悬PBMC,96孔板,5*10^5个PBMC/每孔,100uL细胞悬液/每孔; (2)使用类器官无血清培养基重悬类器官,向含T细胞的96孔板中加入250...
免疫检查点受体信号的抑制改变了癌症治疗,尽管其广泛使用且有效,但免疫检查点阻断 (ICB) 仅在一部分癌症患者中产生持久反应。类器官共培养体系能够帮助研究调节 ICB 反应和抵抗的机制,助力相关药物的研发和上市。 图1. PDO-TIL杀伤体系下的PD-1抗体药效。a. TIL杀伤肿瘤类器官(PDO)代表性视野,蓝色标记TIL,绿色标...