在该筛选方法中重组体和空载体的颜色分别是白色和蓝色。在蓝白斑筛选中,使用的培养基含有X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷),这是一种可以被β-半乳糖苷酶切割的底物,切割后会产生深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝,使菌落呈现蓝色。对于空载体(即未插入外源DNA的质粒),当其在宿主细胞(...
DNA空载体重组体电泳条带区别 电泳的迁移率,取决于核酸分子本身的大小和构型,分子量较小的DNA分子比分子量较大的DNA分子迁移要快些。这就是应用凝胶电泳技术分离DNA片段的基本原理。
转染过表达质粒来探究其对细胞行为的影响时,发现转染空白质粒很明显地抑制了细胞增殖,测CCK8的时候Blank(只加了转染试剂):NC(转染空白载体):Overexpression组吸光度大概是1.2:0.8:1.0,请问有小伙伴遇到过类似情况吗?换了两个载体都是类似的结果,谢谢🙏
②核酸内切酶酶切图谱分析:利用核酸内切酶切割重组体,然后电泳检测进一步确定重组体是否含有目的基因。③分子杂交法:可把待选菌在平板上培养成菌落,用硝酸纤维素膜盖在平板上,菌落DNA就会转移到滤膜上,然后用放射性同位素(32P)标记的目的基因片段作为探针进行检测,就可把正确的重组菌落探测出来。
白色和蓝色。蓝白斑筛选是一种基因工程常用的细菌重组子的筛选方法。白色菌落为DNA重组子,蓝色菌落为空载体。
表达产物跑SDS-page,和空载体表达产物对比,才能知道目的基因是否表达。谢谢
琼脂糖凝胶电泳可用于鉴别DNA分子的长度,下图为琼脂糖凝胶电泳图像,图中显示了空载体(不含目的基因X的质粒载体)和重组载体(含有基因X的质粒载体)在限制酶的作用下呈现的线性DNA的电泳结果。SalI和XhoI为两种限制酶,且切割DNA均形成黏性末端,下列说法错误的是( ) A. 凝胶中DNA分子的迁移速率仅取决于DNA分子的大小 ...
根据实验结果,C组细胞为实验组,A组细胞和B组细胞为对照组。因此C组细胞应导入含BAK基因表达载体,A组细胞不导入任何外源DNA作为对照,B组细胞导入空载体,排除空载体对实验结果的影响。根据实验结果,三组细胞从分子水平上比较了BAK蛋白的含量。反馈 收藏
目前,腺病毒载体的包装系统主要有两种:AdMax系统和Adeasy系统。这两种包装系统都是二质粒系统,即需要一个骨架质粒和一个携带外源基因的穿梭质粒;都需要能够表达E1基因的293A细胞作为包装细胞,另外293A细胞为单层细胞有利于空斑的形成和观察。AdMax和Adeasy的主要区别在于病毒基因组重组的过程不同:AdMax系统:病毒基因组重...
根据本公开内容的另一方面,提供了一种用于基板的真空处理的系统。系统包括真空腔室;根据本文所述任何实施方式的组件,用于在真空腔室中提升或降低载体;和一个或多个处理工具,布置在真空腔室中并选自由沉积源、蒸发源、溅射源、表面处理工具、加热装置、清洁装置、蚀刻工具和其组合组成的组。