A: 可能的原因如下:① 病毒稀释度不够。可先确定病毒滴度,再根据滴度选择稀释度;② 琼脂糖覆盖时温度太高;③ 实验所用细胞系不适合做蚀斑实验,可更换细胞系再尝试; ④ 观察时间比较晚。建议第一次做时,每隔12 h观察一次,大致了解细胞病...
病毒空斑纯化步骤 病毒空斑纯化步骤 猪流⾏性腹泻病毒(PEDV)纯化分离⽅案 (1) 将已准备好的VERO细胞消化均匀铺于6孔板中。(2) 细胞长成单层后吸去培养液，将病毒做10倍稀释，共做5个梯度并向每孔滴加0.4ml稀释好的病毒液, 置37℃吸附2⼩时后弃残液。(3) 制备2％的琼脂糖（PCR电泳胶⼀样的琼脂...
1、PK15细胞铺细胞板,细胞密度要较高,才容易形成空斑(但太高了也不好,有可能会形成很多层细胞,导致有的细胞形成病变的地方有其他层的细胞没有坏死也被染色从而无法形成空斑)。 2、过夜后,用无抗无血的培养基清洗洗吧,然后再进行病毒吸附,原液进行10倍倍...
空斑纯化——精选推荐 空斑纯化/计数 1.病毒的稀释与接种 病毒液用冷DMEM 10倍倍比稀释。待单层MDCK细胞长到90%-100%时，吸弃细胞培养液，用PBS冲洗2次，每孔每次0.1ml。选择不同稀释倍数的病毒液接种细胞，每孔0.2ml，每个稀释度做3个孔，37℃吸附1h。2.覆盖琼脂培养液 将含有双抗的DMEM与2%琼脂液等量...
病毒空斑纯化实验protocal 热度: 新分离呼肠病毒的空斑试验及病毒纯化 热度: 番茄斑萎病毒病毒粒体的提取纯化及质谱分析 热度: 相关推荐 编辑版word 猪流行性腹泻病毒(PEDV)纯化分离方案 (1)将已准备好的VERO细胞消化均匀铺于6孔板中。 (2)细胞长成单层后吸去培养液,将病毒做10倍稀释,共做5个梯度并向每...
空斑纯化/计数1.病毒的稀释与接种病毒液用冷DMEM10倍倍比稀释。待单层MDCK细胞长到90%-100%时,吸弃细胞培养液,用PBS冲洗2次,每孔每次0.1ml。选择不同稀释..
1蚀斑实验需要细胞长至什么程度可以接毒? 显微镜下观察,一般情况下,铺满细胞板底部即可,这样不会造成空洞影响蚀斑观察。不同的细胞不一样,一般时候是长满T25的细胞传一个六孔板,第二天就接毒。 2细胞上用什么覆盖物?琼脂?琼脂糖?低熔点琼脂糖?浓度应该是多大? 我用的是lonza公司的低熔点琼脂糖,终浓度是0.75...
病毒空斑纯化步骤.docx,猪流行性腹泻病毒(PEDV)纯化分离方案 将已准备好的VER(细田胞消化均匀铺于6孔板中。 细胞长成单层后吸去培养液,将病毒做 10倍稀释,共做5个梯度并向每孔 滴加0.4ml稀释好的病毒液,置37°C吸附2小时后弃残液。 ⑶ 制备2%的琼脂糖(PCR电泳胶一样的琼脂
病毒空斑纯化 病毒蚀斑如同噬菌体的噬斑，一个蚀斑为一个病毒体的繁殖后代品系。在细胞培养中做蚀斑是一种较精确的测定病毒感染的方法，将病毒各稀释度种入单层细胞瓶，吸附1h，在单层细胞上覆以营养琼脂培养基，病毒在细胞中繁殖使细胞死亡。但由于琼脂的限制只能感染临近的细胞，形成“蚀斑”的退化细胞区，经...
病毒空斑纯化实验 病毒空斑纯化实验 病毒空斑纯化实验 EV71空斑纯化实验protocal 原理 病毒传染细胞后,由于固体介质的限制,释放的病毒只能由最初传染的细胞向周边扩展。经过几个增殖周期,便形成一个限制性病变细胞区,此即病毒蚀斑。一个蚀斑是由最初传染细胞的一个病毒颗粒形成的,接种的病毒液要充分分别和稀释。