(1)空斑实验:测定病毒空斑形成单位(PFU,plaque forming unit),用于流感病毒滴度测定及标定病毒的感染能力。 (2)电子显微镜:直接计数单个病毒颗粒。 (3)实时荧光定量PCR、Western Blot、ELISA和流式细胞术等方法测定病毒组分(如DNA、RNA或蛋白质)。但与空斑试验不同,这些方法并...
虽然使用专业仪器来分析可见空斑确实具有一些优势,但是实验室用的最多的还是传统的肉眼计数空斑的方法。目前该检测方法存在一些局限性,可见空斑的形成需要培养很长时间,尤其是当需要通过肉眼进行计数时,不同的病毒,可计数的空斑通常需要4~10天才能形成。当使用低通量培养皿处...
空斑实验名词解释空斑实验名词解释 空斑实验是一种生物学实验方法,用于检测和测量病毒的繁殖和扩散。在细胞培养中,将病毒接种在单层细胞上,然后在病毒自感染细胞释放后覆盖一层含营养液的琼脂层。由于病毒不能悬浮于液体中,只能感染邻近与之接触的细胞,因此感染区由原始病灶向四周扩大,形成类似细菌的菌落,该菌落被称...
【实验原理】溶血空斑试验，又称空斑形成细胞（plague forming cell，PFC）试验，是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将经绵羊红细胞（SRBC）免疫的小鼠脾细胞（含有抗体形成细胞，PFC）与一定量的绵羊红细胞和补体混合孵育。PFC所分泌的抗体和绵羊红细胞结合形成抗原抗体复合物，在补体作用下可使绵羊红细胞溶解，在特...
空斑实验是一种成熟的病毒浓度测量方法,因为它与感染剂量有关。该实验依赖于确定在单层病毒感染细胞中产生的空斑形成单位 (PFU) 的数量。病毒感染的细胞裂解时会形成空斑,从而导致随后的感染循环和邻近细胞的裂解。 用结晶紫等染料对固定的细胞单层进行染色,可观察到空斑。使用 Agilent BioTek Lionheart FX 全自动...
一、目的测定病毒空斑形成单位(PFU,plaque forming unit),用于流感病毒滴度测定及标定病毒的感染能力。 二、生物安全要求 本实验采用H1和H3亚型流感病毒,相关操作需要在 BSL-2级实验室中进行。 三、实验材料 …
溶血空斑实验溶血空斑试验,又称空斑形成细胞(Plague Forming Cell, PFC)试验,是一种体外检测抗体形成细胞的方法。将一定量洗涤过的绵羊红细胞注射入小鼠腹腔,四天后将小鼠杀死,取脾脏制成脾细胞悬液,内含抗体形成细胞。然后将脾细胞、绵羊红细胞,补体混合孵育。由于PFC 所分泌的抗体和绵羊红血球结合形成抗原抗体复合...
病毒滴度=空斑数（17）*稀释倍数（10^6）/病毒稀释液体积（0.1）=1.7*10^8PFU/ml。建议多做...
通过显微镜观察染色后的细胞,可以看到细胞内膜上的空斑形成情况。同时,还可以对细胞空斑的数量、大小、分布等进行分析,从而研究细胞膜的结构和功能。 三、细胞空斑实验的注意事项 1. 细胞培养需要在无菌环境下进行,避免细菌和真菌等的污染。 2. 细胞贴壁需要一定的时间,一般需要24小时左右,具体时间根据细胞系的不同...
将绵羊红细胞SRBC与SRBC免疫的小鼠脾细胞混合孵育，脾细胞中的抗体形成细胞PFC可释放抗红细胞抗体溶血素，在补体参与下溶解周围的SRBC，形成肉眼可见的圆形透明的溶血空斑。每个空斑的大小表示该脾细胞产生抗体能力的强弱，而空斑数量反映机体总的抗体产生能力。