稳定同位素标记化合物分析巯基类质谱技术扫描离子液相色谱-质谱联用技术衍生化试剂稳定同位素标记-液相色谱-质谱联用技术被广泛应用于代谢组学研究中,它克服了部分化合物内标获取困难的问题,可以实现对非目标性代谢物的定性和定量分析 武汉大学化学与分子科学学院冯钰铸和袁必锋等将稳定同位素标记与母离子扫描方法结合,建立...
最强烈的13C油酸标记同位素出现在m/z 957.003处,并且存在于约1/5浓度的未标记内源性三油酸甘油酯处。就总量而言,检测到的所有13C油酸标记甘油三酯的总和不到总未标记(内源性)甘油三酯浓度的1%,说明在不干扰自然生物学的情况下进行这些示踪研究的可行性。 采用稳定同位素示踪方法研究脂质动力学有许多实际益处。一个...
随着质谱(massspectrometry)技术的不断发展和蛋白质组学研究的不断深入,稳定同位素标记 (stableisotopelabeling)结合质谱技术获得了很大的进展.该方法主要包括两种不同的标记技术路线【1],一种称为代谢标记法(metaboliclabeling),是以同位素元素或同位素标记的氨基酸形式在培养细胞时引入;另一种称为化学标记法,是在蛋白质...
另 一种定量策略是引 进稳定同位素化学标记结合质谱技术的定量策略。 由 于多肽和蛋白 质的质谱响应值受许多难以控制的因素的影响, 特别是其离子化效率受其他物质和条件的影响很大, 具有很强的体系依赖性, 因而不能对来自 相同肽段 9 次质谱检测得到的信号强度像色谱定量中那样进行比较定量IPJ。 一个肽的惟一...
同位素蛋白质组标记定量化学蛋白质 生物技术通讯 !"##"$% &’ (&)#"*+’)!),- ./0123 ’/14 5678 9::; 蛋白质组学(<=/>?/@ABC)是从整体的角度分析细胞内动态变 化的蛋白质组成成分、表达水平和修饰状态,了解蛋白质之间的 相互作用和联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一门 新的学科。其中...
本研究基于3种特征肽段EAFGVNMQIVR(大豆球蛋白G2)、YLGYLEQLLR(牛乳α-S1酪蛋白)、GGLEPINFQTAADQAR(卵清蛋白)和1种稳定同位素标记的肽段(EAFGVNMQI* (I*, 13C6, 15N) VR),建立了一种同时定量鱼糜制品中大豆、牛奶和鸡蛋过敏原的新型液相色谱质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。蛋白提取后经胰蛋白酶进行消化...
近年来,稳定同位素化学标记结合质谱技术在定量蛋白质组学、代谢组学及转化医学等领域得到了广泛的应用.从同位素标记的官能团的角度进行了分类,除了传统的、商品化的同位素标记技术,还综述了一些最新报道的针对巯基、氨基和羧基等基团的特异性和非特异性同位素标记的策略及应用等方面的研究进展,并对此方面的发展趋势和应用...
细胞培养氨基酸稳定同位素标记-质谱技术槲皮素HepG2细胞热休克蛋白目的观察槲皮素对人肝癌细胞HepG2中热休克蛋白(HSP)发达的影响,为其抗肿瘤活性探寻可能的靶点.方法经过连续传代,充分氚化HepG2细胞中的亮氨酸,并鉴定其标记率.采用四早基偶氮唑蓝(MTT)法检测槲皮素对HepG2细胞中的亮氨酸,并鉴定其标记率.采用四早...
利用稳定同位素标记氨基酸(stableisotope labeling by amino acids in cell culture,SILAC)技术,联合线性离子阱回旋共振质谱仪(LC-LTQ-FT)鉴定由14-3-3 sigma过表达引起的差异表达蛋白,将质谱鉴定为表达>2倍或<0.5倍的蛋白作为差异蛋白.通过检索人类蛋白参考数据库(Human protein reference database,HPRD)和蛋白质...
细胞培养氨基酸稳定同位素标记-质谱技术(SILAC-MS)获得了槲皮素作用前后HepG2细胞中HSP90,HSP70,HSP60和HSP20的定量信息.相对正常HepG2细胞而言,所有鉴定的HSP在50 μmol/L槲皮素作用48h后均有较大程度的表达下调,其中HSP90表达下调至正常HepG2细胞的49.3%,HSP70表达下调至正常HepG2细胞的43.6%.RT-PCR的检测...