1、稀释复性是蛋白质复性常用的方法,其缺点是变性剂稀释速度太快,不易控制。2、解决办法就是直接加入水或缓冲液,放置过夜,然后等待稀释即可。
蛋白质复性浓度 正确折叠的蛋白质的得率低通常是 由于多肤链之间的聚集作用 , 蛋 白质的浓度是蛋白 质聚集的主要因素。因此 , 复性时一般将蛋白稀释到很低的浓度,如10-100μg/mL 〕 , 以 减少蛋白分子间的相互作用。如果变性蛋 白过快加入复性液中, 容易形成絮状沉淀 , 可能是蛋白质重新凝聚的缘故 。所以...
1、蒸发法。将溶液加热,使其中的溶剂蒸发,从而使溶液浓度增加;2、结晶法。将溶液冷却至饱和状态,然后缓慢地蒸发溶剂,使溶质逐渐结晶出来;3、离子交换树脂法。将离子交换树脂加入稀释溶液中,使其吸附溶液中的离子,然后用盐水或酸洗树脂,使离子重新释放出来等等。
目前大家在这方面研究也比较多,有研究证明一些分子伴侣有助于蛋白的复性;同时稀释、透析、渗透是最经典的蛋白复性的方法;另外氨基酸如精氨酸、糖类、醇类、表面活性剂对蛋白的复性都有辅助作用,还有很多的表达系统可以助复性。 本公司主要通过梯度透析和稀释的方法对变性蛋白进行复性。 梯度透析法 梯度透析缓冲液配方: ...
犬干扰素-γ的稀释复性及活力测定
至于电泳,一般包含体稀释复性选用最多的浓度是100-200ug/mL,所以应该可以直接电泳的(不建议用浓缩,弄不好容易引起变性,到时候结果不好分析),盐酸胍也是可以直接电泳的(比如在用碘乙酰胺分析二硫键进行电泳的时候常常是在盐酸胍中),当然不容易走的很漂亮。不过最好能够根据样品浓度调节上样量,一般考染5-10ug还是很...
稀释复性效果不好,直接用分子筛层析柱去除变性剂同时复性效果好。
通过体外复性将包涵体转变成具有高活性的重组蛋白是目前生产重组蛋白的一个令人关注的问题,已出现了一些复性方法,3~5,,如稀释复性,折叠促进剂协助复性,层析复性,分子伴侣复性等,而稀释复性是一种简单快捷的蛋白质复性方法,也是研究其他复性方法的基础,目前有关重组人7,干扰素包涵体复性研究较少,因此本论文将通过培养E...
重组人7-干扰素包涵体稀释复性 靳挺关怡新费峥峥姚善泾 <浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江杭州310027> 摘要采用稀释法研究了重组人7-干扰素包涵体复性条件,如温度.p ~值.蛋白浓度.复性液中脲浓度,同 时对加样操作方式进行了考察,得到了较为适宜的复性条件.结果表明,脲能有效地抑制复性过程中蛋白质的聚集,...
重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶包涵体的稀释复性 维普资讯 http://www.cqvip.com