Phos-tag™ MG-Bead是 phos-tag与涂有琼脂糖的磁珠连接而成的产品。磁珠上的phos-tag与磷酸化蛋白结合后,通过使用磁力架吸附磁珠即可完成富集。除蛋白外,还可以富集其他带有磷酸基团的物质。 使用此产品的论文 用于磷酸化SARS-CoV-2 核衣壳蛋白的分离 Yoko, I.et al. :Journal of Proteomics.,255104501 (2022...
亲和色谱富集磷酸化肽段的过程主要涉及3个步骤 (图1B):(1) 孵育:磷酸化蛋白质/肽段上带负电的磷酸基团与金属离子或者金属氧化物结合;(2) 清洗:除去结合的非磷酸化肽段;(3) 洗脱:释放与金属材料结合的磷酸化肽段。 图1磷酸化肽段富集策略 A:磷酸化肽段富集方法;B:基于亲和色谱的磷酸化肽段富集方法的主要...
基于质谱的自下而上(down-top)的蛋白质组研究方法是常见的解析磷酸化蛋白质组方法,下面重点讨论下磷酸化肽段富集。 磷酸化修饰肽段的丰度相对整体细胞而言是很低的,直接地全覆盖质谱检测,非磷酸化的肽段会形成很高的背景信号,影响磷酸化肽段的检测。因此磷酸化肽段的检测,首先需要进行富集;此外,对样品进行预分离...