在已知多糖含量的样品中添加不同浓度标准品,回收率应在95-105%之间。精密度测试要求日内重复测定RSD≤3%,日间RSD≤5%。与蒽酮硫酸法比对时,需注意两种方法对多糖结构的特异性差异,戊糖和己糖在苯酚法中显色效率不同,必要时进行校正。方法检出限通常为2μg/mL,定量限为5μg/mL,具体数值需通过空白样品测定确定...
使用苯酚硫酸法测定多糖，就是使用比色法来进行的。1.使用比色法检测，就先要制作标准曲线。也就是称取标准的葡聚糖（如果用葡萄糖，需要考虑校正系数0.9），分别稀释8个梯度浓度，以0为空白，蒸馏水补充。然后加入6%的苯酚和硫酸溶液，摇匀静置30分钟，要在分光光度计的490nm波长下，测定每个点的吸光度，可以...
苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物.再以比色法测定. [操作] 1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml...
硫酸苯酚法测多糖的原理及操作步骤如下: 1. 原理。 多糖是一类碳水化合物,其分子中含有多个糖基,如葡萄糖、果糖、半乳糖等。硫酸苯酚法利用硫酸的强酸性和苯酚的还原性,与多糖发生反应生成有色产物,然后通过比色法测定产物的吸光度,从而计算出多糖的含量。 2. 操作步骤。 (1)将待测样品溶解于水中,得到适当...
硫酸苯酚法的原理是基于多糖与硫酸和苯酚在高温条件下发生反应生成蓝色产物的化学反应。具体步骤如下: 首先,将待测样品中的多糖溶解并加入硫酸。在加入硫酸的过程中,需要严格控制温度,通常在冰水浴中缓慢滴加硫酸,以防止样品发生糊化或者糖类被分解。这一步骤是为了将多糖分解成单糖。 接着,将苯酚溶液加入样品中,在高...
🌡️原理:利用苯酚硫酸法测定多糖含量,是通过糖类化合物在浓硫酸的脱水作用下,与苯酚缩合形成橙红色化合物,该化合物在490nm波长处有最大吸收峰。橙红色的深浅与糖含量成正比,从而可以定量测定多糖的含量。📊绘制标准曲线:首先,精确称取无水葡萄糖10mg,配置成0.1mg/mL的葡萄糖标准液。然后,通过移液枪吸取不同...
实验一 硫酸-苯酚法测多糖含量 1.目的要求 2.测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量 3.2.方法原理 4.糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成 橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度...
🔬首先,你需要知道的是,苯酚硫酸法是基于多糖与苯酚在硫酸存在下发生显色反应的原理。这个反应会产生一种有色物质,其吸光度可以通过分光光度计来测量。📐计算公式如下: 多糖含量(mg/ml)= [(吸光度 / 标准曲线斜率) × 标准曲线截距] / 样品体积(ml)📊标准曲线是通过测量已知浓度的多糖标准品与苯酚硫酸...
糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物,且颜色稳定,在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定其吸光度,并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量,本方法可用于多糖、单糖含量的测定。 3.主要实验仪器及材料 浓硫酸...