破骨细胞TRAP染色步骤如下: 1、使用100ng/mL RANKL与100ng/mL M-CSF的DMEM完全培养基,每两天更新培养液一次,第4天左右开始出现破骨细胞。 2、待诱导出破骨细胞,用2.5%戊二醛固定细胞10min,充分冲洗。 3、用TRAP染液处理50min,充分冲洗后甘油封片。 4、阳性染色细胞呈红色,定位于胞浆,阴性染色细胞呈黄色。...
染色步骤:1.石蜡切片常规脱蜡至水(冰冻切片省略这步)2.切片于纯水洗5分钟3.用组化笔在切片组织上画圈后,置于盛有纯水的湿盒中,用纯水37℃孵育2h。4.倒去组织上纯水后,切片重新放入湿盒,滴加现配过滤好的trap工作液完全覆盖于切片组织上,放于37℃烤箱避光染色20-30 min。
下面是trap染色的步骤: 1.取得骨组织标本并保持其完整性。可以使用钳子、锯子等工具在实验室条件下取得骨组织标本。确保取得的标本相对完整,不要过分损伤,以保持破骨细胞的形态和活性。 2.固定标本。使用4%的中性缓冲福尔马林或其他适当的固定液固定标本。固定可以使标本保存并保持其形态结构,同时也有助于切片过程。