13. 收集到的细胞悬液,通过400g,离心5分钟,离心收集,弃上清后用1×DPBS重悬细胞。 14. 通过细胞计数仪检测细胞活性大于等于85%,背景干净,结团率小于5%,细胞量大于等于5万;可用于后续单细胞测序建库实验。 四、结果展示 注意:皮肤细胞悬液制备中容易出现结团率偏高的情况。我们可以通过DNAseI和其他类型胶原酶辅...
与发表文献对比,所有细胞类群能够mapping,比例高度相似,并且线粒体基因百分较低,证实利用达普Galaxy 对皮肤组织样本单细胞转录组测序的可行性及瑞沃德单细胞悬液制备仪解离的皮肤组织样本可直接对接达普Galaxy单细胞建库系统。 以上单细胞转录测序结果显示:通过瑞沃德自动单细胞悬液制备系统制备的皮肤组织样本可以直接用于达普...
1. 制备细胞培养基:RPMI 1640 + 青霉素/链霉素(终浓度分别为 100 U/ml 和 100 µg/ml)+丙酮酸(0.02 mM) 和 谷氨酰胺 (0.02 mM),不添加血清。 2、制备完全培养基:步骤1制备的细胞培养基+10%人混合血清(HPS);4°C 保存,使用前将培养基调至 20± 2°C。 3. 使用 4 mm圆形活检穿孔仪获取皮肤活...
11.通过细胞计数仪检测细胞活性大于等于80%,背景干净,结团率小于5%,细胞量大于等于5万;可用于后续单细胞测序建库实验。 制备结果 皮肤组织 图1组织大小(含表皮) 镜检 图2单细胞悬液背景干净,无杂质(显微镜镜检) 活性检测 图3单细胞悬液活率达到93%,细胞总数=1...
实验样品:小鼠皮肤组织;由于小鼠皮肤组织中包含多种免疫细胞,多数据表明驻留在皮肤中的免疫细胞具有免疫监视的功能,因此此次实验展开对小鼠皮肤组织的实验研究分析。 实验目的:本次实验是小鼠背部和尾巴上的皮肤,利用单细胞悬液制备仪消化后得到单细胞混悬液,用于后期做流式细胞分析 ...
下列关于动物细胞培养及应用的叙述,正确的是( ) A.需要用胃蛋白酶处理制备单细胞悬液 B.充入5%CO2的作用是刺激细胞正常呼吸 C.可用于检测有毒物质、构建人造皮肤等 D.大多选用动物的受精卵作为动物细胞培养材料 19-20高二下·江苏宿迁·期末 查看更多[2] ...
从小鼠皮肤制备单细胞悬液 方法一: 注:如果需要后续细胞培养,请在超净工作台中无菌操作 1. 将手腕和踝关节正上方的四肢切断,然后完全切断尾巴,留下一个小孔。 2. 要剥下整个皮肤:首先将锋利的剪刀插入尾部的孔中,然后沿着身体的背中线将皮肤剪到脖子上的开口处。接下来,用一把钳子抓住暴露的身体,另一把钳子...
从人体皮肤制备单细胞悬液 一、方法一: 注:如果需要后续细胞培养,请在超净工作台中无菌操作 1. 制备细胞培养基:RPMI 1640 + 青霉素/链霉素(终浓度分别为 100 U/ml 和 100 µg/ml)+ 丙酮酸 (0.02 mM) 和 谷氨酰胺 (0.02 mM),不添加血清。 2、制备完全培养基:步骤1制备的细胞培养基+10%人混合血清...
样本制备成为限制单细胞技术广泛应用的一大障碍,也是科研服务公司和广大科研工作者面临的主要难题。 本次给大家介绍的是皮肤单细胞悬液制备的解离实验 一、皮肤组织背景介绍 皮肤覆盖全身表面,是人体最大的器官之一,可分为表皮与真皮两层,并借皮下组织与深层组织连接。表皮位于皮肤浅层,由角化的复层扁平上皮组成。细胞...