1. 慢病毒转染贴壁细胞实验方法 ① 慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×105/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105/孔左右。 ② 第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。 ③ (对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜...
①瞬时转染:这种方法所需时间较短,但对于某些难以转染的肿瘤细胞,转染效率较低,并且只能在细胞内维持3-5天,最多约一周。 ②稳定转染:对于长期基因表达,实验室最常采用且具高可行性的方法是慢病毒转染(Lentiviral Transduction)。通过慢病毒转染技术,可以将目的基因整合到宿主细胞的基因组中。虽然这种方法所需时间更...
病毒转染 对于不适合脂质体介导转染的细胞类型,通常使用病毒载体进行转染。病毒介导转染也称为转导,这种转染方式可在难以转染的细胞类型中实现蛋白过表达或敲低,是临床研究中最常用的方法(Glover 等人,2005;Pfeifer 和 Verma,2001)。腺病毒、致癌逆转录病毒和慢病毒载体已广泛用于哺乳动物细胞培养物和体内的...
病毒转染技术是一种基因导入方法 •利用病毒载体将外源基因导入宿主细胞•病毒载体包括逆转录病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒等 病毒转染技术的发展经历了多个阶段 •20世纪70年代初期，首次成功利用病毒转染技术将基因导入哺乳动物细胞•20世纪80年代，病毒转染技术在基因治疗领域得到广泛应用•20世纪90年代至今，病毒...
https://www.youtube.com/watch?v=NKuJ8ARm7AI视频无解说,自带英文解释,中文字幕什么的可有可无,只是为了能够顺利通过,顺手加上了中文字幕。, 视频播放量 3215、弹幕量 1、点赞数 35、投硬币枚数 11、收藏人数 85、转发人数 12, 视频作者 核能垃圾桶, 作者简介 工作太忙
病毒转染原理及步骤：一种高效基因转导方法 在细胞实验中，常规方法难以转染的细胞，通过病毒介导实验能显著提升基因转导效率，实现目的基因的高效瞬时表达。病毒转染包括三个主要步骤：构建载体、包装提纯病毒和感染靶细胞。以慢病毒为例，其载体以HIV-1为基础发展而来，具备感染分裂与非分裂细胞的能力，可...
慢病毒转染悬浮细胞实验方法 1、在2×105/ml悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/ml和适量病毒,充分混匀。37℃孵育。或者150g室温离心4小时(选作,部分难转染的细胞系采用此步骤可以提高转染效率)。 2、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后(或离心结束后)加入等体积新...
CRISPR慢病毒转染法是一种高效引入CRISPR基因编辑系统到目标细胞中的技术,旨在实现对基因的有针对性编辑或调控。 实验步骤: 1、质粒构建:构建好含有CRISPR-Cas9系统的质粒,其中包括lentiCRISPR-sgRNA。该质粒携带sgRNA序列,可指导Cas9蛋白准确识别并切割目标基因(之前已详细描述过)。
今天我们来聊聊一个超级酷的技术——肠道类器官的慢病毒转染。想象一下,你能通过慢病毒把基因传递到肠道类器官里,是不是很神奇?别急,咱们一步步来。 原代肠细胞的慢病毒感染情况 🧬 首先,咱们得看看这个流程图。图一展示的是用慢病毒有效感染肠道类器官的关键步骤。简单来说,就是先把肠细胞和慢病毒放在一起...