电转化步骤如下:1. 从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻; 2. 取1 μl 纯化后的质粒于一1.5ml的离心管中,将其和0.1CM的电极杯一起置于冰上预冷。 3. 将40~100ul解冻的感受态细胞转移至此1.5ml 的离心管中,小心混匀,冰上放置10min。 4. 打开电转仪,调至Manual,调节电压为2.1KV...
农杆菌感受态制备和转化:电转法和热击法 电转法 1) 挑取新鲜单菌落接种到10mL YEP培养基(含50ug/ mL利福平)的试管里,28℃、200r/min培养过夜。 2) 稀释2 mL培养过夜的农杆菌到含200 mL YEP培养基的500 mL三角瓶里, 28℃、200r/min培养至OD600达0.5。4℃、5000 r/min离心5分钟收集细胞。 3) 用适量...
载体法和非载体法.载体法是以农杆菌Ti质粒和Ri质粒为介导的方法,适用于双子叶植物和少数单子叶植物的遗传转化.非载体法是通过各种物理和化学等手段,将DNA直接导入受体细胞进行遗传转化,主要包括基因枪法、PEG法、电激法、脂质体法、显微注射法、激光微束法、超声波法、碳化硅纤维法、电离子透入法及花粉管通道法...
因此科学家研发了一种通过基因工程使得稻米的食用部分胚乳含有维生素a的前体--胡萝卜素的大米,胡萝卜素在人体内会转化成维生素a,可以缓解人体维生素a缺乏.这种大米因胡萝卜素含量极高因而呈现金黄色,被称为“黄金大米”.黄金大米的制作过程应用了根癌农杆菌介导法进行转基因操作,将能够合成胡萝卜素的酶的基因重组...
百度试题 结果1 题目基因工程中,目的基因的插入通常使用哪种方式? A. 电穿孔 B. 化学转化 C. 热激法 D. 农杆菌介导法 相关知识点: 试题来源: 解析 D