⑸ 样品回收:电泳结束后在紫外灯下观察样品的分离情况,对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收,如电泳洗脱法:在紫外灯下切 取含核酸区带的凝胶,将其装入透析袋(内含适量新鲜电泳缓冲液),扎紧透析袋后,平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中,100V电泳2-3小时, 然后正负电极交换,反向电泳2分钟,使透析袋
电泳分析法 Highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE 一、概述generalization 在电解质溶液中,位于电场中的带电离子在电场力的作用下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象,称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同,迁移速率不同,可实现分离。1937年,Tiselius(瑞典)将蛋白质混合液放在两段...
1) 第一法,纸电泳法; 2) 第二法,醋酸纤维素薄膜电泳法; 3) 第三法,琼脂糖凝胶电泳法; 4) 第四法,聚丙烯酰胺凝胶电泳法; 5) 第五法,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE法); 6) 第六法,等电聚焦电泳法。 那么以上六种电泳分析方法的主要...
接下来是凝胶电泳。它是以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等为支持介质,通过区带电泳法进行分离。其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)尤为突出,广泛应用于蛋白质及小分子核酸的分离。△ 等电聚焦电泳 此外,等电聚焦电泳也是一种重要的电泳技术。它利用pH梯度的介质,对等电点不同的蛋白质进行分离。这种方...
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。
常用的电泳分析方法: 1.醋酸纤维素薄膜电泳:醋酸纤维素是指纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯,由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质吸附小,能消除电泳中出现的“托尾”现象。具有分离速度快、样品用量小的特点。适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。 2.凝胶电泳:以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝...
【仪器分析】11-高效毛细管电泳分析法-1(基本原理), 视频播放量 17902、弹幕量 23、点赞数 231、投硬币枚数 80、收藏人数 410、转发人数 133, 视频作者 Ruiting_Chen, 作者简介 一个沉迷于摄影的化学老师,相关视频:【仪器分析】11-高效毛细管电泳分析法-2(分离效率和谱
单细胞凝胶电泳法(Single Cell Gel Assay),通常亦称之彗星分析法(Comet Assay)。它之所以称为彗星分析法是因为被破坏的DNA形似彗星,此方法是具有敏感性又具快速性的方法,可测出被破坏细胞的损害程度。 原理: 在细胞核中,DNA是环状附着在核基质上,细胞裂解过程中,核基质被溶解、抽提,DNA的结构则未发生变化。如果DN...
电泳图分析法电泳图分析法 三步法分析电泳图: 例1、CRISPR/Cas9 基因编辑技术根据靶基因序列设计向导SgRNA,精确引导核酸酶Cas9切割与SgRNA配对的DNA,相关酶在修复断裂 DNA的过程中会改变连接部位的碱基序列。科研人员通过删除编码 PD-1 蛋白基因的 2、3、4 片段造成蛋白质的功能缺失,制作PD-1基因敲除鼠的流程如图1...