具有NADP偏好性的FDH突变体与还原性酮胺化酶级联，实现了对环己酮的还原胺化。在全细胞催化中，转化率达到72%。这项研究避免了传统级联反应进行还原胺化过程中添加额外甲酸盐和胺造成的pH难以控制的问题。同时，甲酰胺作为溶剂可以增加底物的溶解度，拓宽了FDH在生物催化中的适用性。
同时,作者将FDH的辅酶偏好性由NAD+转变为NADP+,实现了FDH催化N-甲基甲酰胺同时产生电子供体和胺供体。最后将FDH突变体与来自米曲霉的还原性酮胺化酶进行级联,完成了对环己酮的还原胺化。 首先,作者通过定点诱变得到了能催化的甲酰胺、N-甲基甲酰胺和 N,N-二甲基甲酰胺裂解成二氧化碳和胺、同时再生辅酶NAD(P)H...
常见的甲酸脱氢酶有两种类型，分别是NAD+-依赖性甲酸脱氢酶和NADP+-依赖性甲酸脱氢酶。这两种甲酸脱氢...
稳态动力学分析表明D195A突变体表现出最高的3-NADP+ KTS值。 总之,这项工作证明了一种关键酶在新型非经典辅因子选择性方面的工程,并表明罗斯曼折叠结构域中的天冬氨酸(D195)是参与区分NAD(P)(H)磷酸化状态的关键位点,应作为其他氧化还原酶的研究目标,这些氧化还原酶可通过这种有趣的非经典辅因子进行活性改造。
来源于大肠杆菌表达的甲酸脱氢酶(NADP)(Formate dehydrogenase),属于氧化还原酶。甲酸脱氢酶仅与甲酸盐和NADP在适合的条件下反应,不与乙酸盐、草酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、丙酸盐或抗坏血酸盐反应,也不会还原NADP。经纯化获得的甲酸脱氢酶,常用于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)的再生、催化甲酸(甲酸铵等)生成CO2 同时...
含有NADP 的PseFDH V9 结构图图8MycFDH、辅酶及关键氨基酸残基的结构示意图图9 酶法合成l-叔亮氨酸图10 苏氨酸脱氢酶、亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶偶联催化合成l-2-氨基丁酸工艺路线图11 GfDH催化PPO不对称还原生产l-草铵膦图12l-氨基酸合成d-氨基...
重组NADP+依赖甲酸脱氢酶的表达及纯化 林日辉 梁 跃 农 勉 张陆成 (广西民族大学化学与生态工程学院,广西南宁530006) 【摘 要】利用甲酸脱氢酶(FDH)催化甲酸脱氢反应是酶促有机合成中重要的还原型烟酰胺辅酶再生系统。实验对E.coli BL21(DE3)/pET32/Bsp—FDH诱导表达NADP+依赖甲酸脱氢酶的表达条件进行了优化,在...
氧化还原酶广泛应用于制药,精细化工品合成以及手性材料的生产等领域,且多数反应的完成需要烟酰胺辅酶NAD(P)H发挥作用.NADPH价格昂贵,重复利用率低,因此,需要构建合适的辅酶再生系统来解决此类问题.其中,甲酸脱氢酶(FDH)再生体系在所构建的酶偶联辅酶再生系统中经济效率最高,而NADP+依赖型甲酸脱氢酶是构建氧化态辅酶和...
英文同义词:FormateDehydrogenasePseudomonasspec.,recombinantmutanteto79900fromE.coli;FormateDehydrogenasePseudomonasspec.,recombinantmutanteto79900NADP-dependantfromE.colifromE.coli;FormateDehydrogenasePseudomonasspec.,recombinantfromE.coli;IFDH;FDH;FORMATEDEHYDROGENASE;FORMATE:NADOXIDOREDUCTASE;FORMATE:NAD+OXIDOREDUCTASE ...
氨基酸等方面具有 明显的优势,其应用越来越受到重视.而在氧化还原酶 所催化的反应中,合成产物的同时会消耗一定量的辅 酶,约80%的反应需要尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD, NADH)作为辅酶,10%的反应以尼克酰胺腺嘌呤二核苷 酸磷酸(NADP,NADPH)为辅酶,只有很少一部分以黄 素(FMN,FAD)和辅酶Q(PQQ)为辅酶 [1] ....