生物大分子凝集体(biomolecular condensates)是由蛋白质和核酸组成的无膜结构,它们通过液 - 液相分离(LLPS)形成。这些凝集体已知能够在植物和动物中暂时和空间地调节多种生物活动和细胞过程。使用重组蛋白进行体外相分离实验是检查经历 LLPS 的蛋白质特性的一种标准方法。 一种详细的使用体外表达和纯化的重组蛋白进行体...
现在有越来越多的证据表明,液-液相分离(LLPS)是细胞中无膜区域形成的基础。这个认识激发了大量的努力,以描绘这种生物分子凝聚体在正常细胞中的功能,以及它们在从发育到与年龄相关的疾病等各种环境中的角色。人们对理解这些生物凝聚体的基础生物物理原理和特性,以及将这些理解应用到各种生物过程和系统中,有着极大的兴趣。
对于这种方法,通过改变溶液条件诱导原溶液的液-液相分离(LLPS),孵育一段规定的时间后通过离心沉淀出密相。取出轻相的一部分,光谱学测定其浓度(例如,通过测量280 nm处的吸光度,在这种情况下应稀释溶液以防止液滴再形成,或使用比色分析法,或者在使用荧光标记蛋白时测定荧光强度)。值得注意的是,如果使用不同的蛋白质...
近日,力学所研制的6个装载蛋白质等生物溶液的样品单元,随天舟八号进入中国空间站,在国际率先开展空间微重力下长时程生物大分子液-液相分离研究,探索微重力环境对生物相分离凝聚体形成过程的影响机制。 蛋白质等生物大分子通过相分离机制组装成具有功能性的...
常见的生物大分子液相色谱分离技术包括凝胶过滤色谱、离子交换色谱、逆相色谱等。 1. 凝胶过滤色谱 凝胶过滤色谱是一种通过颗粒大小来分离生物大分子的技术。它利用颗粒大小分布均匀的凝胶填料,使大分子无法进入凝胶内部,从而较小的生物大分子被排斥在凝胶颗粒外部,实现分离。这种技术对于生物大分子的分离和制备具有重要...
对于生物大分子(如蛋白质和核酸)来说,这种相分离以一种液滴的形态存在, 称为生物大分子液-液相分离(Liquid-liquid phase separation, LLPS)。生物大分子的液-液相分离已经被观察到,并被认为可能是无膜细胞器、染色质和肌动蛋白丝动态组装的重要机制。近年来,...
《生物大分子的液相色谱分离和制备第二版》由科学出版社于1993年3月1日出版。内容介绍 本书较为系统而详细地论述了生物大分子的液相色谱分离和制备。内容包括液相色谱的基本原理和参数，顶替色谱、离子交换色谱、体积排阻色谱、反相色谱、疏水作用色谱、亲合色谱、中低压制备色谱、灌注色谱、蛋白质制备色谱的分离和设计...
生命体动态地利用固有无序蛋白质(intrinsically disordered protein, IDP)以及RNA、DNA等生物大分子通过液-液相分离实现细胞区室化,进而实现生物学功能的时空调控[2]。在结构-性质-功能的研究范式下,发展适用于生物大分子凝聚体的结构解析方法,明晰生物大分子凝聚体结构特征、聚集机制和调控规律,对于理解凝聚体的生物学...
液体实体分离 方法:载玻片压线虫胚,看颗粒反应 →两个小颗粒,碱性 变形、分开→p颗粒:液态 2009 核仁&核质 phase transition ↑ 多价生物大分子互作 4个相同proline rich motif→extensive的网络,两两互作 SH3 离心: Dilute phase 稀释相 Condensed phase 浓缩相 ...